6-FAM SE 

6-FAM SE (6-carboxyfluorescein succinimidyl ester) is a fluorescent labeling reagent. 6-FAM SE is used for oligonucleotide labeling and DNA sequencing^[1].

1. 样本制备^[1]：
1) 收集待染色的细胞或生物样本。对于细胞样本，确保细胞处于对数生长期，收集细胞后用适当的缓冲液 (如 PBS) 洗涤两次，以去除培养基中的血清和其他杂质。
2) 用细胞计数仪或血球计数板对细胞进行计数，调整细胞浓度至合适的范围。
2. 染料储备液制备：
1) 称取适量的 6-FAM SE 粉末，根据其分子量和所需浓度计算所需的质量。一般来说，6-FAM SE 的分子量约为 467.4。
2) 将 6-FAM SE 粉末溶解在无水 DMSO 中，配制成高浓度的储备液，通常为 1-5 mM。例如，若要配制 1 mM 的储备液，可将 467.4 μg 的 6-FAM SE 溶解在 1 mL 的 DMSO 中。将储备液分装到无菌的小离心管中，避免反复冻融，可在 -20℃ 或更低温度下保存。
3. 工作液制备：
在使用前，取出一管染料储备液，室温下解冻。用预热至 37℃ 的细胞培养基或缓冲液将储备液稀释至所需的工作浓度，一般为 0.5-5 μM。例如，取 10 μL 的 1 mM 储备液，加入到 2 mL 的培养基中，即可得到 5 μM 的工作液。
4. 具体染色步骤：
1) 将制备好的细胞样本与染料工作液按照适当的比例混合，一般细胞悬液与工作液的体积比为 1:1 或 1:2。例如，取 1 mL 的细胞悬液，加入 1-2 mL 的染料工作液。
2) 轻轻混匀，使细胞充分接触染料，在 37℃、5% CO₂ 的培养箱中孵育 15-30 min。期间可轻轻振荡或颠倒几次，以确保染色均匀。
3) 孵育结束后，用预冷的缓冲液洗涤细胞至少两次，以去除未结合的染料。每次洗涤后，以适当的离心速度 (如 300-500 g) 离心 5-10 min，弃去上清液。
4) 最后，将染色后的细胞重悬于适量的缓冲液或培养基中，即可用于后续的实验分析，如流式细胞术检测、荧光显微镜观察等。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

473.39

C₂₅H₁₅NO₉

92557-81-8

固体

Yellow to orange

515

488

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

• [1]. Gu YS, et al. Capillary electrophoresis of baclofen with argon-ion laser-induced fluorescence detection. J Chromatogr A. 2002 Oct 4;972(2):289-93.  [Content Brief]