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JC-1 该怎么操作不再疑惑！

 

 

最近很多客户问我们的技术小姐姐，“JC-1 是买回来啦，我该怎么用啊？”“MCE 的 JC-1 有简单易懂的 Protocol 吗” 这不，您要的 Protocol 来啦，一看就会，一遍就能记住的那种！
 

 

前面我们介绍过 JC-1 的检测原理， JC-1 的试剂盒到手啦，但是该怎么操作呢？

 

 

MCE JC-1 Kit 资料 ● ●

 
规格：1T, 1 mL (100 万细胞)
用途：早期细胞凋亡
检测设备：荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细胞仪
通道：FITC 通道看绿色，PI 通道看红色
指示：红绿荧光比例变化
 

■ 细胞染色

悬浮细胞和贴壁细胞的使用方法基本相同，我们以贴壁细胞为例：

 

注：若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞，可先对贴壁细胞进行消化、收集，重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光显微镜或共聚焦显微镜检测，方法如下：

 
a. 以 6 孔板为例，每孔加入 1mL 细胞培养液。
 
b. 阳性对照的设置：取适量 CCCP (50 mM) 恢复至室温，阳性对照孔培养基中加入 1 μL，其终浓度为 50 μM，轻摇混匀，细胞培养箱 37℃ 孵育 5 分钟。
 
c. 取适量 JC-1 (200 μM) 恢复至室温，每孔培养基中加入 10 μL JC-1 (200 μM)，其终浓度为 2 μM，轻摇混匀，细胞培养箱 37℃ 孵育 15-20 分钟。
 

 

d. 37ºC 孵育结束后， 吸除上清，用 PBS (1×) 洗涤 2 次。

 
e. 加入 500 μL 的 PBS (1×)，用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察 (绿色荧光：Ex/Em=510/527 nm，可用 FITC 通道；红色荧光：Ex/Em=585/590 nm，可用  PE/PI 通道)。
 
是不是很简单？动动手指，分享一下，再也不用担心师弟师妹不会用 JC-1 啦！

Measurement of mitochondria membra ne potential by JC-1 staining. HeLa cells are incubated with or without WOs for 24 h, followed by NIR irradiation for NIR and WOs+ NIR groups (JC-1 purchased from MCE). [1]
 
参考文献 

1. Fei Wang, et al. Urchin-like tungsten suboxide forphotoacoustic imaging-guided photothermal and photodynamic cancer combinationtherapy. New J Chem. 18 Oct 2017.

 
 

 

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