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科研助攻丨化合物不知道怎么用？达咩！

 

 

    ：全实验室经过一番 818 开学季囤货 “厮杀”，get 好多 MCE 新品，冰箱是满满的，心里却有丢丢疑惑的...
    ：？？？
    ：买了小分子化合物，重组蛋白， 还有一些试剂盒，储存溶解使用，不得不说，这是个大工程！
   : 害害害... 何必忧愁，本 M 帮你一一解锁！
 

 

为了帮助小可爱解决开学的 “烦恼” ，小 M 今日特来解锁小分子化合物 (说白了，就是萌 Cece 为大家整理的小分子产品的使用小贴士，让省心走进科研，速速收藏吧）。 
 
 
 
Part 1: 产品选择
 
 
 
 
(1) 同一个靶点，好多产品
 
 
 
选择产品之前，一定要明确实验目的，小分子抑制剂/激活剂大多是依据具体的信号通路或者靶点进行分类的，确定好靶点信号通路之后，才能准确的选择出合适的产品进行实验。当然，同一个靶点会有好多的产品，这个时候该如何抉择：
 
 
a. 文献就是 YYDS！文献自有 everything!
 
(
 
见推文：检索工具总动员
，
总有一款适合你） 
b. 文献里居然寥寥无几哇，还好靶点是确定的！这时可以优先选择生物活性高或者在 MCE 官网排名高的 (排名高的产品往往有过客户验证)，当然，一千个科研人，一千个实验结果，具体问题具体分析。
 
 
(2) 同一个产品，不同的形式
盐形式是活性药物成分 (API) 存在的一种固态形式，与游离态具有相同的活性成分。成盐可改变化合物的理化性质，如溶解度、结晶度、吸湿性和稳定性等，多数 API  常常以盐酸盐、甲磺酸盐、氢溴酸盐、富马酸盐、醋酸盐、钠盐、钙盐、钾盐等形式。既然不改变活性，那它们存在区别到底是什么?
 
 
最大区别的就是溶解度了！(还有个区别就是有无现货）
 
 
 
 
■ 
以热卖产品 Compound C 为例
 
 
在 2 个产品都有现货的前提下，就要从溶解度的角度来选择了。从溶解度数据来看，2 个产品在 DMSO 中的溶解度均为 10 mM。HY-13418A Compound C 在水中需要加酸调节 pH 才能增加溶解性，而 HY-13418 Compound C 盐酸盐形式易溶于水。所以在相同活性的情况下，只是细胞实验，那么二者皆可；动物实验，那么优先选择具有水溶性的盐形式啦！
 

 

再以 HY-12815A (MCC950 sodium) 与 HY-12815 (MCC950) 为例，两个产品生物功能一样，但 HY-12815 没有现货，所以优先选择 HY-12815A。
 
 
 
Part 2: 产品储存
 
 
 
 
 
(1) 一扫通，通往的顺利之路
 
 
在拿到产品后，可先瞅瞅产品 COA，COA 上面会明确标明产品的本身形态：固体 or  液体
 
 
 
小 M 接到客户反馈：我没有买那个 10 mM*1 mL 规格的，为什么到手是液体呢？有些产品因为自身熔点低，比如维生素 E (熔点在 2-3 °C)，本身就是液体），纯度，储存条件及注意事项。当然，没有纸质说明书也没关系。
‍‍‍‍
 
(见推文：‍
 
科研助攻：MCE 那些小工具你都会用吗？)
 
 
(2) 产品储存，不纠结

大多化合物较稳定，储存条件为:固体粉末：-20°C 3 年，4°C 2 年；溶液：-80°C 半年，-20°C 1 个月 。或者顶多加个条件：Protect from light (避光)；Away from moisture (产品易吸潮，需防潮保存)；Stored under nitrogen (充氮气保存，产品易被氧化，需要惰性条件保存）当然，也有部分 “不安分” 的产品，标签和说明书都注明。

‍‍
 
*该产品在溶液状态不稳定，建议您现配现用，即刻使用（不建议配制储备液长期保存，最好做到现用现配）
 
‍‍

 

 

 
 
Part 3: 产品使用
 
 
 
 
(1) 开盖前离心
 
 
 
在产品运输过程中，粉末或溶液可能会附着到管壁或管盖上。开封前使用离心机低速离心，可减少产品的损失。
 
 
 
(2) 
产品配置
 
 
 
 
 
 
 
■  
 
细胞实验
 
：
 
 
 
 
 
购买实验使用的量很少啦！规格较小，且产品本身也很稳定，可直接按照官网推荐的溶剂 (比较常见是 DMSO, ddH2O, 无水乙醇等) 配置成母液，可分装储存。
 
 
 

小贴士

多数产品在细胞实验使用剂量都在 μM 级别，但是给药前还是得做好功课，有些药物，比如 AICAR，3-MA 它们的给药浓度就是很高哇！0.5-10 mM 是它们的常用剂量。

 
有些小可爱还会发现：咦，有些溶剂怎么好生奇怪？DMF？THF？这是什么？非常规溶剂，莫要一棒子打死，合理利用，一样是你的好帮手。
(见推文：溶剂大比拼——细胞实验篇
)
 
 
 
■ 动物实验：
 
 
 
害，说到动物实验，值得纠结的点就更多了：
 
  小白： “小 M, 10% DMSO 会不会把我的鼠毒死啊”；“小 M, 我的药是 0.5% CMC-NA 直接溶的，我能一次把多天的溶好吗？”；“小 M, 我不会算啊！！”；“小 M, 助溶剂这么复杂，我怎么设置对照？” ......
(见推文：小鼠的吐槽大会
)
 
  靓M 忧伤中： “小鼠以体重 25 g 为例，正常小鼠没有严重免疫缺陷的鼠，200 uL 给药体系，DMSO 占比 10%：也就是里面有 20 uL，小鼠可耐受，当然，体弱小鼠另说”；“且不说小鼠多天用同一管药物，发生污染了小鼠心情如何，更重要的是，家人们，你确定这是可以复溶么？”；“剂量计算，何不使用传闻中的溶解度计算器？”；“当然设置对照啊！想要实验做的好，对照必然少不了！
(见推文：对照设计-动物实验篇
)" 。
 
 
 

小贴士

配制溶液时若出现难溶情况，可以采用水浴加热 (一般 37 ℃；多肽产品一般控制在 25℃ 左右) 或者超声 (20-40 kHz，注意是清洗超声仪器！探头超声仪器不推荐，不推荐！！) 的方式辅助溶解。

 
 
一口气说这么多，累了累了, 希望伙伴们能有所收获！
 
 
 
 
 
 
 
 
 

 

 

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