1. Others
  2. Fluorescent Dye
  3. Di-4-ANEPPDHQ

Di-4-ANEPPDHQ 是带双正电荷的极性敏感膜探针,可用于可视化观察拟南芥活细胞膜微结构域。Di-4-ANEPPDHQ 通过嵌入细胞膜后改变脂质环境极性而产生荧光光谱位移,从而量化脂质堆积程度。Di-4-ANEPPDHQ 的激发波长为 488 nm,发射波长在液态有序相和无序相分别为 560 nm 和 650 nm。Di-4-ANEPPDHQ 常用于对活细胞中膜微结构、脂质有序性及膜张力响应的荧光成像研究。

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Di-4-ANEPPDHQ Chemical Structure

Di-4-ANEPPDHQ Chemical Structure

CAS No. : 797785-10-5

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1 mg ¥4200
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5 mg   询价  
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Customer Review

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Di-4-ANEPPDHQ is a polarity-sensitive membrane probe with a doubly positive charge that can be used to visualize membrane microdomains in living Arabidopsis cells. Di-4-ANEPPDHQ produces a fluorescence spectrum shift by changing the polarity of the lipid environment after embedding into the cell membrane, thereby quantifying the degree of lipid accumulation. The excitation wavelength of Di-4-ANEPPDHQ is 488 nm, and the emission wavelengths are 560 nm and 650 nm in the liquid ordered and disordered phases, respectively. Di-4-ANEPPDHQ is often used for fluorescence imaging studies of membrane microstructure, lipid order, and membrane tension response in living cells[1][2][3].

体外研究
(In Vitro)

一、拟南芥 (Arabidopsis thaliana) 活细胞染色[1]
步骤: 1. 样品准备:3 日龄拟南芥幼苗置于 1/2 MS 培养基中,取根毛及表皮细胞用于染色。
2. 染色操作:加入 5 μM Di-4-ANEPPDHQ (溶于 1/2 MS 培养基),冰浴孵育 5 分钟,用冷 1/2 MS 培养基洗涤 1 分钟。
3. 质壁分离验证:用 650 mM Sorbitol (HY-B0400) 处理 5 min,确认染料标记细胞膜而非细胞壁。
4. 荧光检测:使用共聚焦显微镜 (Leica SP5),488 nm 激光激发,双通道采集:绿色通道 500-580 nm,红色通道 620-750 nm。 5. GP 值计算:用 ImageJ 宏程序处理图像。

二、A549 细胞膜张力响应检测[2]
步骤:
1. 细胞培养:A549 细胞培养至汇合或非汇合状态,胰酶 (HY-B2118) 消化后铺于玻璃底培养皿。
2. 渗透压处理:
高渗:加入含 100 mM 蔗糖的培养基孵育10分钟;
低渗:轻度低渗 (25% 1 mM CaCl2+75% 培养基) 或重度低渗 (50% 1 mM CaCl2 + 50% 培养基) 处理 10 分钟。
3. 染色操作:加入 1-5 μM Di-4-ANEPPDHQ,室温孵育 1-30 分钟 (短时标记细胞膜,长时可见内体)。
4. 荧光检测:激发波长 488 nm,发射通道为 500-580 nm 和 620-750 nm,使用 Zeiss 780 显微镜采集光谱图像。
5. 数据分析:通过 GP 值变化分析脂质堆积,低渗处理后 GP 值降低提示脂质排列松散。

三、脂质体 (Liposomes) 与巨质膜囊泡 (GPMVs)[3]
步骤:
1. 脂质体制备:
POPC 与胆固醇按比例溶于氯仿,氮气流下蒸发成膜,真空干燥过夜;
加入 HEPES 缓冲液 (10 mM HEPES (HY-D0857),150 mM NaCl, pH 7.0) 水化 30 分钟,涡旋后经 100 nm 聚碳酸酯膜挤出,脂质浓度 0.5 mM。
2. 染料掺入:Di-4-ANEPPDHQ (水溶液) 按 1:100 摩尔比加入水化后的脂质体,终浓度约 10 μM。
3. GPMVs 制备:RBL-2H3 细胞用 25 mM 多聚甲醛 (HY-Y0333)+10 mM DTT (HY-15917) 于 37°C 处理 1 小时,收集后用 250 nM Di-4-ANEPPDHQ 染色 30 分钟。
4. 光谱检测:
稳态光谱:Fluorolog-3 光谱仪,488 nm 激发,发射范围 500-700 nm;
时间分辨光谱 (TRES):470 nm 脉冲激光激发,检测 540-700 nm 发射,分析荧光衰减动力学。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

665.54

Formula

C32H47Br2N3O2

CAS 号
性状

固体

颜色

Brown to reddish brown

Emission (Em)

635

Excitation (Ex)

465

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式
Powder -20°C 3 years
4°C 2 years
In solvent -80°C 6 months
-20°C 1 month
溶解性数据
细胞实验: 

DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (75.13 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5025 mL 7.5127 mL 15.0254 mL
5 mM 0.3005 mL 1.5025 mL 3.0051 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
纯度 & 产品资料
参考文献

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO 1 mM 1.5025 mL 7.5127 mL 15.0254 mL 37.5635 mL
5 mM 0.3005 mL 1.5025 mL 3.0051 mL 7.5127 mL
10 mM 0.1503 mL 0.7513 mL 1.5025 mL 3.7563 mL
15 mM 0.1002 mL 0.5008 mL 1.0017 mL 2.5042 mL
20 mM 0.0751 mL 0.3756 mL 0.7513 mL 1.8782 mL
25 mM 0.0601 mL 0.3005 mL 0.6010 mL 1.5025 mL
30 mM 0.0501 mL 0.2504 mL 0.5008 mL 1.2521 mL
40 mM 0.0376 mL 0.1878 mL 0.3756 mL 0.9391 mL
50 mM 0.0301 mL 0.1503 mL 0.3005 mL 0.7513 mL
60 mM 0.0250 mL 0.1252 mL 0.2504 mL 0.6261 mL
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称:
Di-4-ANEPPDHQ
目录号:
HY-D1428
需求量: