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Exosome Isolation and Purification Kit (From Tissue) 

组织外泌体提取纯化试剂盒

Cat. No.: HY-K1067
Manual COA SDS 技术支持

MCE 组织外泌体提取纯化试剂盒使用独特的分离技术，可快速高效地从多种组织（如脑、心、肺、肝、肌肉、淋巴结、胸腺、胚胎、肿瘤等）中分离纯化外泌体。

Exosome Isolation and Purification Kit (From Tissue)

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构（单位）同一产品试用装仅限申领一次，同一机构（单位）一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户。

规格 价格 是否有货
20 T ￥6233 询问价格 & 货期

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  • 描述及优势

  • 储存条件 & 期限

  • 操作流程

  • 注意事项

  • 包装

  • 文件资料

描述及优势

外泌体 (Exosome) 是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡 (30 - 150 nm)，广泛存在于血液、唾液、尿液及乳汁等体液中。外泌体具有细胞信使功能，参与细胞通讯。

MCE 组织外泌体提取纯化试剂盒使用独特的分离技术，可快速高效地从多种组织（如脑、心、肺、肝、肌肉、淋巴结、胸腺、胚胎、肿瘤等）中分离纯化外泌体，且获得的外泌体纯度和活性较高，可用于电镜分析、NTA 粒径分析、 Western Blot、qPCR、细胞生物学和动物实验等。
储存条件 & 期限

缓冲液 A2：-20°C，2 年

缓冲液 B2、外泌体纯化过滤器 2：常温，2 年。
操作流程
样本预处理

1. 实验准备

1) 离心机使用前 4°C 预冷 10 min。

2) 将缓冲液 A2 置于 4°C 冰箱中融化后取适量于冰上备用。

注：首次解冻缓冲液 A2 后建议进行适当分装，尽量避免反复冻融。

2. 组织预处理：在消毒器皿（置于冰上）中将组织剪切成1 mm3 - 3 mm3 的组织碎块（剪切得越小越好）并转移至离心管中，加入 ≥ 10 倍体积的 PBS (1×) 充分混匀。300 g (2,000 rpm) 离心 10 min，弃上清。

注：以上离心操作基于小型离心机 (有效半径 ~ 7 cm) 和 ≤ 2 mL 离心管条件进行。体系较大建议分管离心，下同。

3. 组织消化：按每 0.1 g 组织加入 1 mL 缓冲液 A2 的比例，将组织碎块与缓冲液 A2 混匀在 2 mL 离心管中，置于横向恒温摇床 37°C 80 rpm 孵育 20 min。

注：也可选择 37°C 水浴锅孵育 30 min，建议每隔 5 min 手动混匀一次。

4. 离心除杂

1) 8,000 g (10,100 rpm) 离心 10 min，收集上清。

2) 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 10 min，收集上清。

 

外泌体提取

1. 按每 1 mL 上述预处理的样本加入 250 μL 缓冲液 B2 的比例，将预处理得到的上清与缓冲液 B2 混匀，立即将离心管盖盖紧，涡旋振荡 1 min 使其充分混匀。4°C 静置孵育 1 h 以上。

注：a. 延长以上静置孵育时间可提高外泌体得率，但不可超过 24 h。

b. 缓冲液 B2 需室温保存，温度过低可能出现白色结晶或沉淀切难以复溶（需要高温水浴复溶），少量沉淀一般不影响外泌体提取效果。

2. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 30 min，收集沉淀。尽可能吸尽上清，沉淀中富含外泌体颗粒。

3. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 2 min，收集沉淀。

4. 取适量 PBS (1×) 重悬外泌体沉淀使其充分溶解。

注：建议每 0.1 g 组织样本对应外泌体沉淀用 200 μL PBS 重悬。

5. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 2 min，收集上清。上清中富含外泌体颗粒。

注：若观察到沉淀较多，可重复以上离心操作直至无明显沉淀。

 

外泌体纯化与保存

1. 外泌体纯化

将收集得到的外泌体粗品转移至外泌体纯化过滤器上室中，4°C 3,000 g (6,200 rpm) 离心 10 min，收集过滤器管底液体，即得纯化的外泌体。

注：a. 若离芯厚发现过滤器上柱中仍有较多液体残留，可将其转移至新过滤器中重复离心收集以回收外泌体。

b. 一般情况下，0.1 g 组织（如心肌组织）外泌体得率为 100 - 200 μg。

2. 外泌体保存

将纯化的外泌体分装后于 -80°C 保存备用，避免反复冻融。
注意事项

1. 样品预处理时，若样本浓度过高或过低，可进行适当稀释或浓缩。离心时可多次离心至无明显沉淀。

2. 本试剂盒中产品均无 RNase 及 DNase，实验过程应避免引入 RNase 及 DNase 污染。

3. 建议使用新鲜制备的样本，避免反复冻融。

4. 若后期需要将获得的外泌体与细胞共培养，可用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
包装
Cat. No. Components HY-K1067A-20 T Storage
HY-K1067A-A Solution A2 48 mL -20°C
HY-K1067A-B Solution B2 12 mL RT
HY-K1067A-C Exosome Purification Filter 2 (EPF) 20 Tubes RT
文件资料

Manual (1226 KB) SDS (4610 KB)
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称：
组织外泌体提取纯化试剂盒
目录号：
HY-K1067
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