1. Others
  2. Fluorescent Dye
  3. JC-1

JC-1  (Synonyms: CBIC2)

目录号: HY-15534 纯度: 98.04%
COA 产品使用指南

JC-1 (CBIC2) 是一种广泛用于检测线粒体膜电位的理想荧光探针。JC-1 染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1 聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光 (Ex=585 nm, Em=590 nm) ;在线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,产生绿色荧光 (Ex=514 nm, Em=529 nm) 。

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JC-1 Chemical Structure

JC-1 Chemical Structure

CAS No. : 3520-43-2

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In-stock
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In-stock
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IF

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Bioact Mater. 2022 Aug 11;21:20-31.  [Abstract]

    JC-1 (20 min at 37 °C in dark) staining is used to analyze mitochondrial membrane in H9C2 cells.

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: ACS Nano. 2022 Mar 28.  [Abstract]

    To investigate the mitochondrial membrane potential, ACCO is stained with JC-1 for 30 min, washed with PBS, and analyzed by flow cytometry using 488 nm excitation with 530/30 and 585/42 nm band-pass filters.

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Pharmacol Res. 2022 May;179:106123.  [Abstract]

    Mitochondrial membrane potential (Δψm) is measured with fluorochrome dye JC-1 (15 μM; 37 °C for 30 min in darkness). Flow cytometry is used to measure red (aggregation of JC-1) and green (monomeric JC-1) fluorescence intensity in HUVECs.

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Small. 2021 Aug;17(32):e2101368.  [Abstract]

    Laser scanning confocal fluorescence microscopy images of JC-1, LysoTracker Red DND-99, and AO staining for determining mitochondrial membrane potential, lysosomal deacidification, and lysosomal membrane permeabilization, respectively.

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Small. 2021 Feb;17(7):e2005865.  [Abstract]

    In 4T1 cells, A549 cells, and HeLa cells, cells are treated with JC-1 (5 µg/mL) for 20 min in the darkness, the fluorescence is observed by flow cytometry and the fluorescent color of the cells was observed with a fluorescence microscope, respectively

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Small. 2021 Feb;17(7):e2005865.  [Abstract]

    In 4T1 cells, A549 cells, and HeLa cells, cells are treated with JC-1 (5 µg/mL) for 20 min in the darkness, the fluorescence is observed by flow cytometry and the fluorescent color of the cells was observed with a fluorescence microscope, respectively

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Mol Cancer. 2019 Apr 10;18(1):85.  [Abstract]

    KRA-533 induces caspase 3 activation and reduces mitochondrial membrane potential in NSCLC cells. The measurement of mitochondrial membrane potential by JC-1 staining.

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: Small. 2019 Sep;15(36):e1902642.  [Abstract]

    H9C2 cells are rinsed with pre-cooled PBS for 3 times and collected in PBS buffer containing 10 µg/mL JC-1 probe. After incubation for 20 min in dark place, cells are rinsed with PBS twice by centrifugation to remove the supernatant. Finally, H9C2 cell pellets suspended in PBS are analyzed by a flow cytometric analyzer.

    JC-1 purchased from MCE. Usage Cited in: New J Chem. 2017 41(23).

    Measurement of mitochondria membrane potential by JC-1 staining. HeLa cells are incubated with or without WOs for 24 h, followed by NIR irradiation for NIR and WOs + NIR groups.
    • 生物活性

    • 纯度 & 产品资料

    • 参考文献

    生物活性

    JC-1 (CBIC2) is an ideal fluorescent probe widely used to detect mitochondrial membrane potential. JC-1 accumulates in mitochondria in a potential dependent manner and can be used to detect the membrane potential of cells, tissues or purified mitochondria. In normal mitochondria, JC-1 aggregates in the mitochondrial matrix to form a polymer, which emits strong red fluorescence (Ex=585nm, Em=590nm); When the mitochondrial membrane potential is low, JC-1 cannot aggregate in the matrix of mitochondria and produce green fluorescence (ex=514nm, em=529nm)[1].

    体外研究
    (In Vitro)

    JC-1 染色液的配制
    1.1 制备储存液
    用 DMSO 配制 5 mg/mL 的 JC-1。如用 1 mL DMSO 溶解 5 mg JC-1。
    注:1) JC-1 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
    1.2 工作液的配制
    用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 1-20 μg/mL 的 JC-1 工作液。
    注:1) 请根据实际情况调整 JC-1 工作液浓度,且现用现配。
    2) 如果 JC-1 进入细胞的效果不好,可向工作也液中加入适量 20% Pluronic F127 溶液,终浓度为 0.02-0.05%,Pluronic F127 可以防止 JC-1 在缓冲液中聚合并帮助其进入细胞。
    JC-1染色
    1) 以6孔板为例进行细胞铺板,密度为 5×105 cells/mL。37℃,5% CO2 培养箱培养过夜。
    注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过 1×106/mL,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
    2) 取 0.5 mL 细胞悬液至无菌的离心管内。
    3) 400 g 离心 3-5 min;弃上清。
    4) 用 1 mL JC-1 工作液重悬细胞,于 37℃,5% CO2 培养箱孵育 15-30 min。
    5) 室温条件 400 g 离心 5 min;吸掉上清。
    6) 用 2 mL 细胞培养液或者缓冲液重悬细胞,之后室温条件 400 g 离心 5 min;弃上清,重复两次。
    7) 用 1 mL 新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞,立刻进行后续的流式分析或荧光显微镜观察。
    8) 数据分析 (流式细胞仪) :含有红色 JC-1 聚集物的健康细胞线粒体用 FL2 通道检测;含有绿色 JC-1 单体的凋亡或不健康细胞用 FL1 (FITC) 通道检测。
    注:若用于酶标仪检测,用 300 μL 缓冲液重悬细胞;然后按照每孔 100 μL 的量将染色好的细胞转移到不透光的 96 孔板内,即可进行荧光酶标板分析。

    MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

    分子量

    652.23

    Formula

    C25H27Cl4IN4

    CAS 号
    性状

    固体

    颜色

    Purple to purplish red

    Emission (Em)

    527/590

    Excitation (Ex)

    490

    运输条件

    Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

    储存方式

    4°C, sealed storage, away from moisture and light

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

    溶解性数据
    In Vitro: 

    DMSO 中的溶解度 : 5 mg/mL (7.67 mM; 超声助溶 (<60°C); 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

    H2O 中的溶解度 : < 0.1 mg/mL (insoluble)

    配制储备液
    浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
    1 mM 1.5332 mL 7.6660 mL 15.3320 mL
    5 mM 0.3066 mL 1.5332 mL 3.0664 mL
    查看完整储备液配制表

    * 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
    储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

    • 摩尔计算器

    • 稀释计算器

    Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

    质量
    =
    浓度
    ×
    体积
    ×
    分子量 *

    Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

    This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

    浓度 (start)

    C1

    ×
    体积 (start)

    V1

    =
    浓度 (final)

    C2

    ×
    体积 (final)

    V2

    In Vivo:

    请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

    以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
    ——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
    以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

    • 方案 一

      请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

      Solubility: 1.25 mg/mL (1.92 mM); 悬浊液; 超声助溶

      此方案可获得 1.25 mg/mL的均匀悬浊液,悬浊液可用于口服和腹腔注射。

      1 mL 工作液为例,取 100 μL 12.5 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

      生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
    • 方案 二

      请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

      Solubility: 1.25 mg/mL (1.92 mM); 悬浊液; 超声助溶

      此方案可获得 1.25 mg/mL的均匀悬浊液,悬浊液可用于口服和腹腔注射。

      1 mL 工作液为例,取 100 μL 12.5 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。

      20% SBE-β-CD in Saline 的配制(4°C,储存一周):2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。
    动物溶解方案计算器
    请输入动物实验的基本信息:

    给药剂量

    mg/kg

    动物的平均体重

    g

    每只动物的给药体积

    μL

    动物数量

    由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
    请输入您的动物体内配方组成:
    %
    DMSO +
    +
    %
    Tween-80 +
    %
    Saline
    如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠,建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
    方案所需 助溶剂 包括:DMSO ,均可在 MCE 网站选购。 Tween 80,均可在 MCE 网站选购。
    计算结果
    工作液所需浓度 : mg/mL
    储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO(母液浓度为 mg/mL)。

    *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

    您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,以下方案仅供参考,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
    动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液,加入 μL  μL ,混合均匀至澄清,再加 μL Tween 80,混合均匀至澄清,再加 μL 生理盐水
    连续给药周期超过半月以上,请谨慎选择该方案。
    请确保第一步储备液溶解至澄清状态,从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 (超声清洗仪,建议频次 20-40 kHz),涡旋吹打等方式辅助溶解。
    纯度 & 产品资料

    纯度: 99.0%

    染色示例
    参考文献

    JC-1 相关分类

    完整储备液配制表

    * 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
    储备液的保存方式和期限:-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时,请在6个月内使用,-20°C储存时,请在1个月内使用。

    可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
    DMSO 1 mM 1.5332 mL 7.6660 mL 15.3320 mL 38.3300 mL
    5 mM 0.3066 mL 1.5332 mL 3.0664 mL 7.6660 mL
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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