A：
建议使用70μm的细胞筛或尼龙膜研磨脾脏。可以将细胞筛或尼龙膜事先使用PBS或者培养基润湿，然后将脾脏和筛网一起浸润在液体中进行研磨，对细胞的损伤会小一些。
Q：
磁珠如果一不小心冻起来，是彻底就不能用了吗？
A：
磁珠需要4℃存放，不能冻存，冻存之后就无法使用了。
Q：
组织难解离，消化后仍有细胞团或者有杂质怎么办？
A：
可用胶原酶、DNA 酶、胰酶联合消化，可使细胞团块解聚，或者充分振荡，混悬细胞，打散细胞团块，也可采用细胞筛网来过滤团块。去除杂质操作可以：去死细胞，密度梯度离心或离心清洗去碎片。
A：
分选前未经过裂红的单细胞悬液若是要进行流式检测，建议进行裂红，若是不裂红进行流式检测，建议分析细胞的时候不要将FSC-SSC图中的红细胞圈进去，或者增加CD45指标来排除红细胞对目的细胞分析的干扰。分选后的细胞悬液由于已经去除了红细胞，因此不需要进行额外裂红。
A：
常规操作中的离心、洗涤等步骤均会产生少量死细胞，另外如果样本本身就是一些细胞活性较差的类型，例如分选脑这种非免疫类的组织制备的单细胞悬液时，会发现细胞活性非常差。因此推荐大家做流式实验时，除非细胞活率很高，尽量都不要省去死活染料的搭配。目前市面上常用的死活染料主要有两大类：核酸类死活染料和胺基类死活染料。核酸类死活染料在染色结束后，最后加入，常用染料有PI、7-AAD、DAPI等。
A：
为保证分选效率和质量，尽量浓缩分选的起始样本，推荐样本中细胞浓度为1 x 107/mL重悬，1mL分选时间约40min。
