Hoechst 34580 tetrahydrochloride  (Synonyms: HOE 34580 tetrahydrochloride)

Hoechst 34580 tetrahydrochloride is a marker dye in Hoechst series. Hoechst is A live nuclear marker dye. Hoechst binds to the grooves in the DNA double strand, which tends to be A/ T-rich DNA strand. Although it binds to all nucleic acids, the A/ T-rich double strand DNA significantly enhances fluorescence intensity Therefore,Hoechst dye can be used for living cell labeling. The fluorescence intensity of Hoechst dye increases with the increase of pH of solution^[1].

Amyloid-β^[1]

Hoechst 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储存液。
注：Hoechst 储存液建议分装后于 -4℃ 或 -20℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，终浓度为 10 μg/mL Hoechst 工作液。
注：请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10⁶/mL
2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 3-10 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。


注意事项
1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

597.41

C₂₇H₃₃Cl₄N₇

2310135-08-9

固体

Light yellow to khaki

451

356

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

4°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

* 备注：如您选择水作为储备液，请稀释至工作液后，再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

• [1]. Thai NQ, et al. Discovery of DNA dyes Hoechst 34580 and 33342 as good candidates for inhibiting amyloid beta formation: in silico and in vitro study. J Comput Aided Mol Des. 2016 Aug;30(8):639-50.  [Content Brief]