1. 技术支持

Technical Support

Hotline:400-820-3792

E-mail:tech@MedChemExpress.cn

产品指南

包装内有哪些物品?

包装盒,泡沫保温盒,装箱单,蓝冰 (或低温盒) ,化合物产品。打开包装后,请确认以上物品是否齐全,如有缺失,请致电 021-38924433,售后人员会及时给予处理。

产品说明书和质检报告等资料如何获取?

A、发货后, MCE 会将产品说明书和质检报告以电子版形式发送至您的邮箱。 B、可以在官网 (www.MedChemExpress.cn) 相关产品的详情页面中下载。 C、可致电 021-38924433,或发送邮件至 sales@MedChemExpress.cn 向客服人员索取。

收到货物后,包装内的蓝冰 (或低温盒) 已化,是否会导致产品变质?

MCE 的大部分产品在室温环境中都是稳定的,包装内的低温盒是为了预防运输过程中可能出现的极端温度情况。因此当您收到产品时,若蓝冰 (或低温盒) 已化,并不会影响其质量,请放心使用。对于一些特殊的、对外在条件比较敏感的化合物产品,我们会在产品发出时做额外的包装处理,确保质量。

产品的储存条件是什么?

产品 COA 上会明确标明具体的储存条件及注意事项。

以下是一些 常规 抑制剂产品的储存方法:

固体粉末: -20°C 3年
  4°C 2年
溶液: -80°C 半年
  -20°C 1个月 (超过一个月建议复检, 以免影响活性)

对于特殊产品,请参照 COA 中该产品的储存条件。

产品配制或使用前需要怎样处理?

在产品运输过程中,粉末或溶液可能会附着到管壁或管盖上。所以,建议开封前使用离心机低速离心,从而减少产品的损失。

如何将产品配成储备液?

可以根据实验需求,选择合适的溶剂制备储备液。

溶解度信息可在 MCE 官网产品详情页查询,目前我们只提供产品在 DMSO 和/或水中的溶解度,如需在其它溶剂中的溶解度,请发送邮件至技术支持邮箱 tech@MedChemExpress.cn 咨询。若未在产品页面中找到溶解度信 息,或出现难溶情况,可以采用水浴加热或者超声震荡的方式辅助溶解,也可通过邮箱 tech@MedChemExpress.cn 咨询 MCE 技术人员。

DMSO > A mg/mL DMSO 易溶 (A mg 可溶于 1 mL DMSO,饱和度未知)
H2O < B mg/mL H2O 不溶或难溶
DMSO < C mg/mL DMSO 难溶 (C mg 难溶于 1 mL DMSO 中)

推荐使用 MCE 官网的摩尔计算器进行计算
www.MedChemExpress.cn/Molarity Calculator.htm

储备液配制完成后建议分装成多管分别冻存,避免使用过程中反复冻融造成的产品失活。

在细胞实验中产品应该如何稀释?

用 ddH2O 作为溶剂配制的母液,可以直接用培养基稀释到所需的工作液浓度。

用 DMSO 作为溶剂配制的母液,在稀释时要确保工作液中 DMSO 的终浓度尽量在 0.1% 以下,最高不要超过 0.5% ,并设置相应浓度的 DMSO 对照组。 稀释过程建议分段进行,避免浓度变化过快导致化合物析出。若稀释过程中出现化合物析出的情况, 可采用超声的方法使其复溶。

在动物实验中如何使用产品 (如给药途径、剂量、溶剂以及给药周期等) ?

用 ddH2O 配制的母液,可以直接用生理盐水或 PBS 缓冲液稀释到实验所需的浓度。

用 DMSO 配制的母液,也可以用生理盐水或 PBS 稀释,为减少对动物的毒性,建议 DMSO 的终浓度不要大于 2% 。有些产品在水中的溶解度很低,DMSO 配制的母液在稀释过程中可能出现析出的情况,可以通过添加助溶剂来帮助溶解,比如 Tween80 、甘油、羧甲基纤维素钠和 PEG400 等。悬浊液可用于口服和腹腔注射,不会影响产品活性。如需帮助,请发送邮件至技术支持邮箱 tech@MedChemExpress.cn 咨询。

在产品详情页面会提供文献中使用的溶解和给药的方式,并不是 MCE 实际测得的结果,不保证其有效性,仅供参考。

Administration volumes considered good practice (and possible maximal dose volumes):

Species Route and volumes (mL/kg)
Oral s.c. i.p. i.m. i.v. (bolus) i.v. (slow inj.)
Mouse 10 (50) 10 (40) 20 (80) 0.05 (0.1) 5 (25)
Rat 10 (40) 5 (10) 10 (20) 0.1 (0.2) 5 (20)
Rabbit 10 (15) 1 (2) 5 (20) 0.25 (0.5) 2 (10)
Dog 5 (15) 1 (2) 1 (20) 0.25 (0.5) 2.5 (5)

Conversion of different model animals based on BSA:

Species Weight (kg) Body Surface Area (m2) Km factor
Dog 10 0.5 20
Rabbit 1.8 0.15 12
Guinea pig 0.4 0.05 8
Rat 0.15 0.025 6
Hamster 0.08 0.02 5
Mouse 0.02 0.007 3
Animal A (mg/kg) = Animal B (mg/kg) multiplied by   Animal B Km
Animal A Km

产品是否无菌?

MCE 液体产品多用 DMSO 配制,由于 DMSO 本身具有极强的杀菌力,配制好的溶液为无菌溶液,只需保持操作环境及仪器无菌即可。若确实需要除菌,建议使用细菌过滤器,切勿高温高压灭菌。

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重组蛋白定制服务

重组蛋白定制服务和长链多肽定制服务如何界定?

<50 AA 一般做多肽合成,>50 AA 多肽合成困难可以尝试蛋白表达,具体方案需要根据目标蛋白的序列进一步评估确定。

MCE 重组蛋白定制服务需要提供哪些信息?

提供蛋白名称与种属、序列信息(如 UniProt ID 或氨基酸序列)及需求量等基本信息,即可快速评估初步方案。如能进一步告知表达系统、标签、纯度、内毒素要求及后续应用等具体需求,可以匹配更精准的定制方案,确保蛋白符合后续应用标准。

MCE 可以定制多少量的蛋白?

提供灵活的规格选择,最小起订量为 50 μg,并支持毫克(mg)至克(g)级别的高纯度蛋白定制。

质粒构建时是否会进行密码子优化?

MCE 构建质粒时通常会进行密码子优化以适配不同宿主菌株,包括 GC 含量、重复序列、密码子偏好性等,经优化后可以显著提高蛋白表达效率、可溶性和稳定性。

MCE 重组蛋白定制服务提供哪些蛋白表达系统?

MCE 能提供大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞表达系统、哺乳动物细胞表达系统以及大肠杆菌无细胞表达系统,各表达系统特点可参考表达系统选择指南表

蛋白的分子量(MW)对蛋白生产有影响吗?

MCE 的蛋白定制服务能覆盖 10-150 kDa 分子量的蛋白表达。超出这个分子量范围的蛋白,生产难度会显著增加,大蛋白易出现翻译延伸故障、错误折叠,小蛋白易被宿主蛋白酶快速降解。

MCE 可以定制哪些融合标签的蛋白?能提供无标签蛋白吗?

MCE 可以提供多种蛋白融合标签,包括 His、GST、MBP、Flag、GFP、Fc 和 Avi 等,各标签具备不同的亲和纯化特性、溶解性增强功能或检测优势,下表详细列明其特性。 我们也支持无标签蛋白的定制,主要通过两种方式实现:一是在标签与目的蛋白之间引入蛋白酶切位点,纯化后切除标签;二是直接构建无标签表达质粒,通过离子交换层析等方法获得目的蛋白。

标签名称 分子量 特点
His < 1 kDa 分子量最小,对目的蛋白结构和功能干扰极低; 应用最广泛,可与多种其他标签联用
GST ~ 26 kDa 可显著提高融合蛋白在胞内的可溶性;标签较大,可以按需选择是否切除
Flag ~ 1 kDa 序列短小、亲水,干扰小;内置肠激酶切位点,便于纯化后精准移除标签
GFP ~ 27 kDa 荧光标签,可直接用于实时监测蛋白的表达、定位、转运及相互作用,无需额外染色
Fc ~ 25 kDa 融合后会通过二硫键形成二聚体
Avi ~ 1.8 kDa 短肽标签,用于制备位点特异性、均一的生物素化蛋白

MCE 能定制生物素化蛋白吗?

MCE 可以提供定点标记和随机标记两种生物素化方式,客户可以根据实验需求选择合适的生物素化方式。在交付生物素化蛋白时,通常会默认包含 HABA 检测,验证生物素标记的成功实现及测定标记效率。

MCE 有哪些蛋白纯化方法?这些纯化方法如何选择?

纯化方法包括亲和层析、离子交换层析、疏水层析和分子筛层析等,在生产中会根据客户需求及蛋白特性进行选择。

各类纯化方法的特点及适用情况如下:

纯化方法 特点 适用情况
亲和层析 利用蛋白与特定配体(如 His、GST、Flag 等标签)的特异性结合进行高效捕获 适用于重组带标签蛋白的纯化
离子交换层析 根据蛋白质在特定 pH 条件下所带电荷的差异进行分离 适用于天然蛋白和标签蛋白的精制纯化或者重组无标签蛋白的纯化
疏水层析 利用蛋白质表面疏水性差异,在高盐条件下增强疏水相互作用,通过降低盐浓度梯度洗脱实现温和分离 适用于膜蛋白和疏水性强的蛋白
分子筛层析 根据蛋白质分子大小和形状差异进行分离 通常作为精细纯化步骤,用于去除聚合体、降解产物等微量杂质

在大肠杆菌蛋白表达系统中,是从细胞裂解液上清中还是包涵体中纯化蛋白?包涵体纯化是怎么操作的?

蛋白从细胞裂解液上清或是包涵体纯化,主要取决于目的蛋白本身的性质及客户的下游应用要求。对于可溶性表达蛋白,我们通常从细胞裂解上清中直接纯化。对于包涵体形式表达的蛋白,我们提供专业的包涵体复性服务。包涵体纯化一般是先纯化后复性,复性步骤会筛选不同复性缓冲液进行蛋白复性实验,直到选择到合适缓冲液,使蛋白达到接近天然的状态。

MCE 定制的蛋白会有哪些质检项?

MCE 定制蛋白默认提供以下基础质控服务:SDS-PAGE 分析(用于分子量鉴定及纯度评估,纯度 ≥90%)、蛋白质浓度测定、内毒素检测(<1 EU/μg)、0.22 μm 滤膜除菌。 另外,MCE 定制的蛋白产品通常以冻干粉形式保存,蓝冰发货。如客户有特殊需求,经提前沟通确认后,也可提供液体蛋白,干冰发货。

MCE 定制蛋白的默认缓冲液是什么?

MCE 没有单一的“默认”缓冲液,常用的缓冲体系有 PBS、Tris 和 HEPES 等。我们会根据定制蛋白的特性和后续实验需求,选择最合适的缓冲液以确保蛋白的活性和稳定性。同时,我们还可以按需在缓冲液中添加甘油/海藻糖等稳定剂或温和的去垢剂,以应对特殊的蛋白性质或应用场景。

MCE 蛋白定制服务最终交付哪些东西?

MCE 蛋白定制服务默认交付纯化目的蛋白、COA 报告以及简单项目报告(包含蛋白表达纯化与质检的基础步骤介绍)。