MitoTracker Green FM 

Mito-Tracker Green is a green fluorescent dye that selectively accumulates in the mitochondrial matrix. MitoTracker Green FM covalently binds mitochondrial proteins by reacting with free mercaptan of cysteine residues, allowing staining of mitochondrial membrane potential independent of membrane potential. Excitation/emission wavelength 490/523 nm.

使用方法

MitoTracker Green FM 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 DMSO 配制 1 mM 的 MitoTracker Green FM。如用 74.4 μL DMSO 溶解 50 μg MitoTracker Green FM。
注：MitoTracker Green FM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 按照 1:5000-1:50000 稀释储存液，配制成 20-200 nM 的 MitoTracker Green FM 工作液。
注：请根据实际情况调整 MitoTracker Green FM 工作液浓度，且现用现配。

2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10⁶/mL。
2.2 加入 1 mL MitoTracker Green FM 工作液，室温孵育 15-45 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 15-45 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

保存条件
-20℃ 避光保存一年

注意事项
1. MitoTracker Green FM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存，避免反复冻融。-20℃ 可保存 1 个月，-80℃ 可保存半年。
2. 请根据实际情况调整 MitoTracker Green FM 工作液浓度。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

671.87

C₃₄H₂₈Cl₅N₃O

201860-17-5

固体

Yellow to orange

523

490

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

• [1]. Gautam N, et, al. A high content imaging flow cytometry approach to study mitochondria in T cells: MitoTracker Green FM dye concentration optimization. Methods. 2018 Feb 1;134-135:11-19.   [Content Brief]

  [2]. Gautam N, et, al. A high content imaging flow cytometry approach to study mitochondria in T cells: MitoTracker Green FM dye concentration optimization. Methods. 2018 Feb 1;134-135:11-19.  [Content Brief]