SMCy5.5 

SMCy5.5 is a SMCy dye (ex. 638 nm; em. 705 nm). The high brightness of SMCy5.5 allows for effective tracking and imaging of lipid droplet exchange between adipocytes. SMCy5.5 can be used for lipid droplet labeling studies^[1].

指南 (以下是我们推荐的方案，本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改)^[1]。
1) 细胞接种：在脂质滴染色前 1 天，将 KB 细胞以 1.5×10⁶ 个细胞的密度接种于 T-25 培养瓶中。
2) 染色前处理：次日移除培养基，用 PBS 冲洗贴壁细胞 2 次。
3) 染料孵育：将细胞分别与 SMCy3.5 或 SMCy5.5 (在含 0.5% DMSO 的 OptiMEM 中配置，浓度为 1 μM) 在 37°C、90% 湿度、5% CO₂ 条件下孵育 3 h。
4) 染料清除：孵育后，弃去含染料的培养基，用 PBS 冲洗 KB 细胞 2 次，加入生长培养基以确保充分去除过量染料，随后再次用 PBS 冲洗。
5) 细胞处理：将细胞胰酶消化后，以 15,000 rpm 离心 3 min，沉淀用生长培养基重悬；将细胞悬液再次离心，沉淀用生长培养基重悬。
6) 细胞混合与接种：将两种细胞悬液按等量充分混合 (总细胞数约 6×10⁶ 个)，然后以 1×10⁵ 个细胞/孔的密度接种于 IBiDi chambered coverglass 中。
7) 细胞核染色：成像前，用 Hoechst (5μg/mL) 孵育细胞 15 min 进行细胞核染色。
固定与洗涤：用 4% 多聚甲醛固定细胞 5 min，随后用 HBSS 洗涤 3 次。
8) 成像时间：在细胞贴壁后 18 h 和 48 h 进行成像。
9) 成像设备与参数：使用 Nikon Ti-E 倒置显微镜；显微镜设置如下：Hoechst (激发光 405 nm，发射光 510 nm)、SMCy3.5 (激发光 532 nm，发射光 600 nm)、SMCy5.5 (激发光 638 nm，发射光 705 nm)。
10) 图像记录与处理：使用 NIS Elements 软件记录图像，随后用 Icy 软件进行处理。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

693.63

C₄₁H₄₆BF₂N₃O₄

2417507-09-4

固体

Brown to black

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

• [1]. Collot M, et al. Ultrabright and Fluorogenic Probes for Multicolor Imaging and Tracking of Lipid Droplets in Cells and Tissues. J Am Chem Soc. 2018 Apr 25;140(16):5401-5411.  [Content Brief]