CM-H2DCFDA 

CM-H2DCFDA is a derivative of H2DCFDA (HY-D0940). CM-H2DCFDA can be used to determine cellular oxidant levels (Ex/Em: 495/530 nm). CM-H2DCFDA is light-sensitive^[1].

指南 (以下是我们推荐的方案，本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改)。
1.1 制备储存液
用 无水 DMSO 配制 5 mM 的 CM-H2DCFDA 储备液。
注：CM-H2DCFDA 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 CM-H2DCFDA工作液。
注：请根据实际情况调整 H2DCFDA 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色（悬浮细胞）
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10⁶/mL。
2.2 加入 1 mL 染料 工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色（贴壁细胞）
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行 观察。
注：若需要用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化重悬后再进行染色。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

577.79

C₂₇H₁₉Cl₃O₈

850013-49-9

固体

White to off-white

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

4°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。

• [1]. Oparka M, et al. Quantifying ROS levels using CM-H2DCFDA and HyPer. Methods. 2016 Oct 15;109:3-11.  [Content Brief]

  [2]. Kolarova H, et al. Production of reactive oxygen species after photodynamic therapy by porphyrin sensitizers. Gen Physiol Biophys. 2008 Jun;27(2):101-5.  [Content Brief]