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  3. 腺相关病毒包装服务

腺相关病毒包装服务

腺相关病毒（adeno-associated virus, AAV）属于细小病毒科（Parvoviridae），是一类无包膜的小型病毒，具有线性单链 DNA（ssDNA）基因组。研究中采用的重组腺相关病毒载体（recombination adeno-associated virus, rAAV）是在非致病的野生型 AAV 基础上改造而成的基因载体，用于向细胞中递送遗传物质。AAV 能够感染分裂期和非分裂期细胞，免疫原性较低，通常不会引发强烈的免疫反应。这些特性使 AAV 成为基因治疗研究中备受青睐的病毒载体。

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图1. AAV基因组结构。AAV 基因组的长度约为 4.7 kb，包含两个开放阅读框——Rep 和 Cap，两侧各有一个 145 bp 的反向末端重复序列（ITR）。

AAV血清型

AAV 血清型是指具有不同细胞嗜性的病毒变体，即它们能够感染不同类型的细胞。血清型的差异源于衣壳蛋白可变区天然存在的序列多样性。

目前研究中常用的 rAAV 载体是通过将 AAV2 型基因组与其他血清型的衣壳蛋白结合而形成的混合型病毒载体，通常表示为 rAAV2/N（其中N代表不同来源的衣壳血清型）。此类重组病毒既保留了 AAV2 血清型所具有的稳定表达和基因组整合特性，又获得了来自不同衣壳血清型的组织感染嗜性——不同血清型衣壳表面的特定结构域可识别并结合特定细胞受体，从而赋予病毒针对特定器官的靶向能力。

表 1: 不同血清型AAV的组织嗜亲性。

AAV特点：

① 极低免疫原性 & 高安全性：免疫原性极低，不易引起炎症或插入突变，安全性突出，为体内实验首选载体。

② 感染范围广：可感染分裂及非分裂细胞，覆盖多种组织类型，应用范围广。

③ 体内表达基因时间长：AAV具有保持长期基因转录表达能力，体内表达3周达高峰，并可维持高水平表达，适合长周期功能研究。

④ 血清型多样：众多血清型，可针对不同组织或细胞类型进行灵活靶向。

AAV生产与质控

在AAV包装过程中，载体质粒携带目的基因及其两侧的反向末端重复序列（ITR，对病毒复制和包装起关键作用）；包装质粒则提供AAV包装所需的rep基因（参与病毒复制）和cap基因（编码病毒衣壳蛋白）；此外还需辅助质粒（Helper，辅助病毒包装）。这三种质粒共转染至293T细胞后，即可启动AAV病毒的复制与包装过程。

MCE AAV病毒的生产和质控遵循国际公认的标准流程，采用三质粒包装系统在293T细胞中进行包装。所获得的病毒颗粒经过超速密度梯度离心和过滤除菌，并通过qPCR对病毒基因拷贝进行滴定。MCE 交付的AAV病毒滴度超过1E+12VG/mL，且无支原体、内毒素等污染，可以满足各类实验的使用要求。

注：对AAV包装过程有不利影响的序列，例如毒性基因、破坏包装细胞完整性的基因、破坏慢病毒RNA基因组完整性的序列、重复序列或者高GC含量序列等，无法保证滴度>1E+12VG/mL。

图2. 三质粒包装AAV的流程图

服务流程

客户提供
确定目的基因名称、序列
选择AAV血清型

载体质粒,包装质粒的制备
辅助质粒的制备

共转染 293T 细胞
AAV 的收集、扩增与纯化
AAV 质量检测

最终交付
高质量 AAV
项目报告

运输/储存

• AAV采用干冰运输。收到AAV后，建议放置于-80℃储存。

• 病毒储存6个月后，建议在使用前重新测定滴度。

• AAV避免反复冻融。

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AAV包装项目需经评估后确定对应的方案和价格。进一步了解服务价格或技术详情等信息，请发邮件至 sales@MedChemExpress.cn 或致电
400-820-3792，直接与我们取得联系。

* 基因名称： * 基因 ID/转录本号：
* 种属：
* 构建信息：
* 是否提供模板： * 是否合成基因：
* 实验目的：
* 启动子：
* 真核抗性：
* 标签：
* 荧光：
* 病毒应用方向： * 病毒滴度及总量：
* 客户姓名： * 公司或机构名称：
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