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Glutathione Agarose 

谷胱甘肽琼脂糖

Cat. No.: HY-K0211
Manual COA SDS 技术支持

MCE 谷胱甘肽琼脂糖以高度交联的 4% 琼脂糖凝胶为基质，可实现高产量，高纯度的 GST 标记蛋白的纯化。

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构（单位）同一产品试用装仅限申领一次，同一机构（单位）一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户。

规格 价格 是否有货 数量
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5 mL ￥950 In-stock
10 mL ￥1680 In-stock
50 mL ￥6700 In-stock

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    purchased from MCE. Usage Cited in: J Med Virol. 2023 Jan;95(1):e28158.  [Abstract]

    GST pull‐down assays to detect ACE2‐RBD association in vitro. First, the GST‐ACE2 and PRMT5 methylated‐GST‐ACE2 were pulled down with the HEK‐293T‐GFP‐RBD lysates, respectively. Then, the GST‐ACE2 SDMA midofication and GFP‐RBD binding with GST‐ACE2 or methylated‐GST‐ACE2 were detected by western blot, respectively. ACE2, angiotensin‐converting enzyme 2; MS, mass spectrometry; PRMT, protein arginine methyltransferases; RBD, receptor‐binding domain; SDMA, symmetric dimethyl‐arginines.

    • 描述及优势

    • 储存条件 & 期限

    • 操作流程

    • 包装

    • 文件资料

    描述及优势

    MCE 谷胱甘肽琼脂糖以高度交联的 4% 琼脂糖凝胶为基质，通过化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。可以用于纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等各表达系统表达的谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽转移酶的重组衍生物。

     

    本产品的规格与实际凝胶体积一致，凝胶含量为 50%。
    储存条件 & 期限

    2-8°C, 2 年
    操作流程

    1. Buffer 的准备

    平衡/洗涤缓冲液, 洗脱缓冲液

    注：平衡/洗涤缓冲液和洗脱缓冲液中可加入 1-10 mM DTT。

    2. 样品处理

    样品在上样前建议离心或用 0.22 μm 或者 0.45 μm 滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

    3. Glutathione Agarose 的装填

    (1) 用去离子水冲洗柱底筛板，确保柱底筛板上无气泡，关闭柱底出口，并在柱底部留出 1-2 cm 的去离子水。

    (2) 将 Agarose 悬浮混匀，小心地将浆液连续地倒入柱管中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。

    (3) 打开柱底部出口，最初让缓冲液缓慢流过层析柱，然后缓慢增加至最终流速，这样可避免液压对所形成柱床的冲击，得到很好的装填效果。当柱床高度稳定后，在最后的装柱流速下至少再上 3 倍柱体积的去离子水。标记柱床高度。

    (4) 关闭柱底部出口。

    4. 样品纯化

    (1) 平衡：使用至少 5 倍柱体积的平衡/洗涤缓冲液平衡层析柱。

    (2) 上样：利用泵或注射器上样。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或使用滤膜 (0.22 μm 或 0.45 μm)过滤。

    (3) 洗杂：用平衡/洗涤缓冲液冲洗柱子，直到紫外吸收达到一个稳定的基线 (一般至少 10-15 倍柱体积)，收集流出组分和洗杂部分。

    (4) 洗脱：用 5-10 倍柱体积的洗脱缓冲液洗脱柱子，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

    (5) SDS-PAGE 检测：将纯化得到的样品 (包括流出组分、洗杂部分和洗脱部分)以及原始样品使用 SDS-PAGE 检测纯化效果。

    5. 填料清洗

    (1) 去除沉淀和一些变性物质：使用 2 倍柱体积的 6 M 盐酸胍溶液清洗，然后立即用 5 倍柱体积的 PBS (pH 7.4) 清洗。

    (2) 去除疏水性结合物质：使用 3-4 倍柱体积的 70% 乙醇或 2 倍柱体积的 1% Triton X-100 清洗，然后立即用 5 倍柱体积的 PBS (pH 7.4) 清洗。
    包装
    Components HY-K0211- 5 mL HY-K0211- 10 mL HY-K0211- 50 mL
    Glutathione Agarose (Settled Resin) 5 mL 10 mL 50 mL
    文件资料

    Manual (234 KB) SDS (189 KB)
    Help & FAQs
    • Do most proteins show cross-species activity?

      Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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    产品名称：
    谷胱甘肽琼脂糖
    目录号：
    HY-K0211
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