VF dsDNA Green Dye  (Synonyms: PiooGreen 双链核酸染料)

VF dsDNA Green Dye is a fluorescent dye for detecting and quantifying double-stranded DNA (dsDNA). VF dsDNA Green Dye fluoresces only when bound to dsDNA, and the fluorescence intensity is proportional to the DNA concentration. VF dsDNA Green Dye does not fluoresce when bound to ssDNA, RNA, or free nucleotides. VF dsDNA Green Dye can detect dsDNA within the range of 25 pg/mL to 1000 ng/mL (Ex/Em = 480/520 nm).

产品介绍
本品为无水的 DMSO 配置的溶液，对于 200 μL 的反应体积，0.1 mL 规格可检测 200 个样品；1 mL 规格可检测 2,000 个样品。

试剂制备
将产品用 1×TE (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5) 按 1：200 的比例稀释。
对于终体积为 200 μL 的检测体系，如需准备 20 个样品测定的工作液，可在 1.99 mL 1×TE 中加入 10 μL VF dsDNA Green Dye。
注意：由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。

实验方法
1. 标准品工作液的配制
将纯化的双链 DNA 制剂 (如 Calf thymus DNA DNA (HY-109517))，加入 1 mL ddH2O，配成 1 mg/mL 的标准液。

2. 染料工作液的配置
5 μL VF dsDNA Green Dye 溶液加入 995 μL TE溶液中。
注意：用 1×TE 将 VF dsDNA Green Dye 稀释 200 倍，现用现配，注意避光。

3. 标准液稀释
3.1 母液稀释：将 1 mg/mL 标准液用 TE 溶液稀释到 100 ng/mL。
3.2 倍比稀释：取 800 μL (100 ng/mL) 的标准液加入到 200 μL TE 溶液中，浓度为 80 ng/mL；取 500 μL (80 ng/mL) 的标准液加入到 500 μL TE 溶液中，稀释到 40 ng/mL；依次倍比稀释，配成 20 ng/mL、10 ng/mL、5.0 ng/mL、2.5 ng/mL。
3.3 标准曲线的制备：倍比稀释后的各梯度标准品溶液和染料工作液各取 100 μL 混匀，避光室温放置 5 min。使用荧光仪检测样品的荧光值，激发波长 480 nm，发射波长 520 nm，用标准品溶液的浓度 (ng/mL) 对应的荧光强度作直线回归，制备标准曲线。

4. 测量待测样品的荧光值，根据标准曲线，计算待测样品浓度。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

PiooGreen 双链核酸染料

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

• [1]. Moreno LA, et al. Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye. J Vis Exp. 2010 Nov 5;(45):2465.  [Content Brief]