1. Others
  2. Fluorescent Dye
  3. AMCA-X SE

AMCA-X-SE 是一种香豆素衍生物,可发生固定的蓝色荧光,NHS 活化酯可以与伯胺基形成稳定的酰胺键,用于标记肽,蛋白质,寡核苷酸的氨基基团的反应染料。最大激发/发射波长:354/442 nm。

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AMCA-X SE Chemical Structure

AMCA-X SE Chemical Structure

CAS No. : 216309-02-3

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

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  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

AMCA-X-SE is a coumarin derivative that generates fixed blue fluorescence and an NHS-activated ester that forms stable amide bonds with primary amine groups. It is used as a reactive dye for labeling amino groups of peptides, proteins, and oligonucleotides. Maximum excitation/emission wavelength: 354/442 nm[1].

体外研究
(In Vitro)

原液制备
1. 蛋白准备
为了获得最佳标记效果,请将蛋白 (抗体) 浓度配制为 2 mg/mL。
1) 蛋白溶液PH值应为8.5±0.5,若PH低于8.0,则用1 M 碳酸氢钠进行调整。
2) 若蛋白浓度低于2 mg/mL,标记效率会大大降低,为了获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。
3) 蛋白必须在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和铵离子的缓冲液中,否则会影响标记效率。
2. 染料准备
将无水二甲基亚砜加入AMCA-X-SE小瓶中,制成10 mM储备溶液,震荡摇匀。
3. 染料用量计算
标记反应所需的 AMCA-X-SE 用量取决于要标记蛋白的用量,AMCA-X-SE 与蛋白的最佳摩尔比为 10 左右。
例:假如所需标记蛋白为 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg AMCA-X-SE,则所需 AMCA-X-SE 体积为 3 μL,详细计算流程如下:
1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG)×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol
2) mmol (AMCA-X-SE) = mmol (IgG)×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol
3) μL (AMCA-X-SE) = mmol (AMCA-X-SE)×MW (AMCA-X-SE) / mg/μL (AMCA-X-SE) = 6.7×10-5 mmol×443 mg/mmol / 0.01 mg/μL = 3 μL (AMCA-X-SE)

使用说明
1. 标记反应
1) 取算好体积的新鲜配制的 10 mg/mL AMCA-X-SE 缓慢加入到 0.5 mL 蛋白样品溶液中,轻轻摇匀混合,然后短暂离心将样品收集在反应管底部。切忌剧烈混匀,防止蛋白样品变性失活。
2) 将该反应小管置于避光处,在室温条件下轻轻摇晃孵育 60 min,每隔 10-15 min,将反应小管轻轻颠倒几次,以充分混合两种反应物,提高标记效率。
2. 蛋白纯化脱盐
以下方案是使用 Sephadex G-25 柱纯化染料蛋白偶联物为例。
1)按照生产说明书制备 Sephadex G-25 柱。
2)将反应混合物装入 Sephadex G-25 色谱柱顶部。
3)当样品运行到顶部树脂表面下方时,立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。
4)向所需样品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱纯化。结合含有所需要的染料-蛋白质缀合物的组分。

注意事项
1. AMCA-X-SE 对光及湿度敏感。即用即配 AMCA-X-SE 溶液并丢弃未使用的部分。
2. 低浓度的叠氮化钠 (≤3 mM 或 0.02%) 或硫柳汞 (≤0.02 mM 或 0.01%) 不会显著干扰蛋白标记;但是 20-50% 的甘油会降低标记效率。
3. 避免使用含伯胺 (例如 Tris,甘氨酸) 或铵离子的缓冲液,它们与待标记蛋白竞争反应。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

443.45

Formula

C22H25N3O7

CAS 号
性状

固体

颜色

White to off-white

Emission (Em)

445

Excitation (Ex)

350

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

-20°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

纯度 & 产品资料

纯度: ≥97.0%

参考文献

AMCA-X SE 相关分类

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

The molarity calculator equation

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量   浓度   体积   分子量 *
= × ×

The dilution calculator equation

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start) × 体积 (start) = 浓度 (final) × 体积 (final)
× = ×
C1   V1   C2   V2
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称:
AMCA-X SE
目录号:
HY-D1085
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