Biotin-Lipopolysaccharide, from E.coli O111:B4  (Synonyms: Biotin-LPS, from Escherichia coli (O111:B4))

Biotin-Lipopolysaccharide, from E.coli O111:B4 (Biotin-LPS, from Escherichia coli (O111:B4)) is a biotin-conjugated Lipopolysaccharide (LPS) (HY-D1056A1) that can be coupled with streptavidin protein. Biotin-Lipopolysaccharide, from E.coli O111:B4 can be used to identify Lipopolysaccharide ligands. Lipopolysaccharides, from E. coli O111:B4 (LPS, from Escherichia coli (O111:B4)) are endotoxins and TLR4 activators extracted from Escherichia coli (E. coli O111:B4) and are classified as S (smooth) type LPS. Lipopolysaccharides, from E. coli O111:B4 possess the typical three-part structure: O-antigen, R3-type core oligosaccharide, and lipid A. Lipopolysaccharides, from E. coli O111:B4 activate TLR-4 in immune cells and can cause significant gastric diseases. Lipopolysaccharides, from E. coli O111:B4 can also induce M1-type polarization in mouse macrophages^{[1][2][3][4][5]}.
It is recommended to prepare a solution with concentration ≥2 mg/mL. Vortex thoroughly for more than 10 minutes. Due to the adsorption characteristics of LPS, silanized container or low adsorption centrifuge tubes should be used for aliquoting and storage, and mix thoroughly before use.

Note:
1. 实验浓度和时间：请勿仅参考一篇文章来确定实验条件。建议在正式实验前，根据细胞系和 LPS 类型查找相关参考文献，且不同的炎症因子达到峰值的所需的诱导时间或最佳浓度可能不同，建议设置浓度和时间梯度，以确定最优的实验方案。
2. 检测指标：LPS 不一定会引起细胞死亡，因此不宜仅仅通过检测细胞活力来确定 LPS 造模浓度和时间，建议检测炎症因子的表达或分泌。
3. 溶剂选择：有文献表明，一定浓度的 DMSO 可显著抑制 LPS 诱导的炎症反应，细胞实验中建议用无菌水配制储备液，然后用培养基进行稀释。
4. 容器选择：由于 LPS 具有吸附特性，会与塑料和某些类型的玻璃结合 (特别是在浓度 <0.1 mg/mL 的情况下)，如果 LPS 浓度超过 1 mg/mL，这种吸附作用相对较小。此外，LPS 在溶液中易形成胶束。因此，粉末溶解时，建议配制浓度 ≥2 mg/mL，充分涡旋震荡 10 分钟以上，必要时辅助超声，如需分装保存，请使用硅烷化容器或低吸附离心管。如果使用玻璃容器，请确保使用前充分混合至少 30 分钟，以重新溶解任何吸附在管壁的 LPS。
5. 浓度单位：LPS 不具备统一的分子量，因为其分子本身呈现异质性与聚集性，天然来源的 LPS 分子量通常在 10-100 kDa 甚至更高。LPS 在文献中常见的给药浓度是质量浓度，比如 ng/mL 和 μg/mL，因此，在实验时，直接配制成质量浓度即可。
6. 过滤除菌：将 LPS 粉末溶于水、生理盐水或 PBS 后，溶液可能会呈现出朦胧或胶体状的外观，且在某些情况下可观察到直径在约 20-30 nm 的微胶粒分布。如需进行过滤除菌，请勿直接过滤储备液，建议稀释成工作液之后用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌。
7. 不同菌株 LPS 的区别：不同货号的 LPS 来自于不同的细菌菌种，对应着不同的脂质 A、核心多糖以及 O-抗原等结构特征，进而影响炎症诱导强度与 TLR4 介导的信号偏向。文献中常见的用于体外或体内炎症模型构建的 LPS 货号是 HY-D1056 和 HY-D1056A1。此外，在特定研究情境下，还会使用与所研究菌种相关的专门来源 LPS，比如，牙周炎相关研究用 HY-D1056D (来源于牙龈卟啉单胞菌)，肺炎相关研究用 HY-D1056B3 (来源于肺炎克雷伯氏杆菌)。选择时应综合考虑实验目的、细胞系的敏感性等因素。

LPS 是革兰氏阴性细菌的主要毒性成分，可激活免疫系统的致病相关分子模式 (PAMP) 和诱导细胞分泌迁移体。LPS 可被 TLR4 识别并激活先天免疫系统，随后促进 NF-κB 的活化和促炎性细胞因子的产生，常用于免疫细胞的刺激、激活、分化实验。
不同的种类细菌会表达不同的结构和生物活性的 LPS。LPS 一般分为两种构型：R (rough) 型和 S (smooth) 型。其中 S 型 LPS 包含典型的 3 部分结构：O-抗原 (O-antigen) (重复寡糖单位的血清特异性多糖)、核心寡糖 (core) (C9 型非重复低聚糖) 和脂质 A (Lipid A) (LPS 的毒性成分)。R 型则不包含 O-抗原，表达粗糙型 LPS。O-抗原的缺乏可影响免疫细胞识别 LPS 的过程。
E. coli 表达 4 种 LPS 血清型：O111:B4，O55:B5，O127:B8，O128:B12。E. coli 0111:B4 菌株表达的 LPS 是已知可引起显著胃部疾病的致病性大肠埃希菌血清型，是文献中引用最多的 LPS 菌株。E. coli 0111:B4 来源的 LPS 可诱导人巨噬细胞 (M1) 极化^[5]。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

固体

white

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

• [1]. Kabanov DS, et al. Structural analysis of lipopolysaccharides from Gram-negative bacteria. Biochemistry (Mosc). 2010 Apr;75(4):383-404.  [Content Brief]

  [2]. Ying Liu, et al. Podocyte-Released Migrasomes in Urine Serve as an Indicator for Early Podocyte Injury. Kidney Dis (Basel). 2020 Nov;6(6):422-433.  [Content Brief]

  [3]. Heinrichs DE, et al. Molecular basis for structural diversity in the core regions of the lipopolysaccharides of Escherichia coli and Salmonella enterica. Mol Microbiol. 1998 Oct;30(2):221-32.  [Content Brief]

  [4]. Cai KC, et al. Age and sex differences in immune response following LPS treatment in mice. Brain Behav Immun. 2016 Nov;58:327-337.  [Content Brief]

  [5]. Vogel DY, et al. Human macrophage polarization in vitro: maturation and activation methods compared. Immunobiology. 2014 Sep;219(9):695-703  [Content Brief]