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Exosome Isolation and Purification Plus Kit (From Plasma and Serum) 

血清/血浆外泌体提取纯化试剂盒(升级款)

Cat. No.: HY-K1063A
Manual COA 技术支持

MCE 血清/血浆外泌体提取纯化试剂盒(升级款)使用独特的分离技术,可快速高效地从血清、血浆中分离纯化外泌体。

1.  客户无需承担相应的运输费用。

2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

规格 价格 是否有货
20 T ¥4714 询问价格 & 货期

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  • 描述及优势

  • 储存条件 & 期限

  • 操作流程

  • 注意事项

  • 包装

  • 文件资料

描述及优势

外泌体 (Exosome) 是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡 (30 - 150 nm),广泛存在于血液、唾液、尿液及乳汁等体液中。外泌体具有细胞信使功能,参与细胞通讯。

MCE 血清/血浆外泌体提取纯化试剂盒(升级款)使用独特的分离技术,可快速高效地从血清、血浆中分离纯化外泌体,且获得的外泌体纯度和活性较高,可用于电镜分析、NTA 粒径分析、 Western Blot、 qPCR、细胞生物学和动物实验等。

储存条件 & 期限

缓冲液 A1: -20°C,2 年。

缓冲液 B1、外泌体纯化过滤器:常温,2 年。

操作流程
样本预处理

1. 实验准备

1) 离心机使用前 4°C 预冷 10 min。

2) 将缓冲液 A1 置于 4°C 冰箱中融化后取适量缓冲液 A1 于冰上备用。

注:首次解冻缓冲液 A1 后建议进行适当分装,尽量避免反复冻融。

2. 取样:冻存样本 25°C 水浴解冻后置于冰上待用;新鲜样本直接置于冰上待用。

3. 样品分装:将样品分装为 500 μL/管,不足 500 μL 则用 PBS (1×) 补齐。

4. 离心除杂

1) 4°C 3,000 g (6,200 rpm) 离心 10 min,收集上清。

注:若观察到沉淀较多,可重复以上离心操作直至无明显沉淀。

2) 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 10 min,收集上清。

注:以上离心操作基于小型离心机 (有效半径 ~ 7 cm) 和 ≤ 2 mL 离心管条件进行。体系较大建议分管离心,下同。

 

去除杂蛋白

1. 每 500 μL 上述预处理的样本中加入 400 μL 预冷的缓冲液 A1,立即将离心管盖盖紧,涡旋振荡 30 s 使其充分混匀。

2. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 20 min,收集上清。

 

外泌体提取

1. 每 500 μL 上述样本中加入 120 μL 缓冲液 B1,立即将离心管盖盖紧,涡旋振荡 1 min 使其充分混匀。4°C 静置孵育 30 min。

注:延长以上静置孵育时间可提高外泌体得率,但不可超过 24 h。

2. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 15 min,收集沉淀。尽可能吸尽上清,沉淀中富含外泌体颗粒。

注:沉淀可能不易观察,可在离心前标记沉淀位置。

3. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 2 min,收集沉淀。

4. 取适量 PBS (1×) 重悬外泌体沉淀使其充分溶解。

注:建议每 500 μL 样本对应外泌体沉淀用 200 μL PBS 重悬。

5. 4°C 12,000 g (12,400 rpm) 离心 2 min,收集上清。上清中富含外泌体颗粒。

注:若观察到沉淀较多,可重复以上离心操作直至无明显沉淀。

 

外泌体纯化与保存

1. 外泌体纯化

将收集得到的外泌体粗品转移至外泌体纯化过滤器上室中,4°C 3,000 g (6,200 rpm) 离心 10 min,收集过滤器管底液体,即得纯化的外泌体。

2. 外泌体保存

将纯化的外泌体分装后于 -80°C 保存备用,避免反复冻融。

注意事项

1. 样品预处理时,若样本浓度过高或过低,可进行适当稀释或浓缩。离心时可多次离心至无明显沉淀。

2. 本试剂盒中产品均无 RNase 及 DNase,实验过程应避免引入 RNase 及 DNase 污染。

3. 为了确保获得的外泌体来源于您的细胞,请使用无外泌体的血清对细胞进行培养。

4. 建议使用新鲜制备的样本,避免反复冻融。

5. 若后期需要将获得的外泌体与细胞共培养,可用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。

6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

包装
Cat. No. Components HY-K1063A-20 T Storage
HY-K1063A-A Solution A1 20 mL -20°C
HY-K1063A-B Solution B1 6 mL RT
HY-K1063A-C Exosome Purification Filter 1 (EPF) 20 Tubes RT
文件资料

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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血清/血浆外泌体提取纯化试剂盒(升级款)
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HY-K1063A
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