DFHBI-1T (solution) 

DFHBI-1T (solution) is a membrane-permeable RNA aptamers-activated fluorescence probe (ex/em=472 nm/507 nm). DFHBI-1T binds to RNA aptamers (Spinach, Spinach2, iSpinach, and Broccoli) and causes specific fluorescence and lower background fluorescence. DFHBI-1T is used to image RNA in live cells^[1][2].
Solvent and concentration: DMSO: 20 mM

指南 (以下是我们推荐的方案，本方案仅提供指南，应根据您的具体需要进行修改)。
1.1 储存液^[1]
注: DFHBI-1T 储存液建议分装后于 -20°C 或 -80°C 避光保存。
1.2 工作液的配制
用无血清培养基稀释储存液，可根据实际情况稀释相应的储备液。注意，如果溶剂为 DMSO，则必须考虑 DMSO 的细胞毒性，并应制备溶剂对照；如果溶剂为纯水，则工作液在加入细胞前需要过滤并除菌。
注:请根据实际情况调整 DFHBI-1T 工作液浓度，且现用现配。
2 具体染色步骤
1) 将表达 Spinach2 标记 RNA 的细胞接种于合适的培养皿或培养板中，在标准细胞培养条件下培养。 2) 吸除旧培养基，用预温的 PBS 轻柔洗涤细胞两次，以去除残留血清和细胞碎片。
3) 向细胞中加入 20 μM 的 DFHBI-1T 工作液，确保完全覆盖细胞单层。
4) 将细胞在 37°C、5% CO₂ 湿润培养箱中与染料孵育 10 min。
5) 孵育后，吸除含染料的培养基，用预温的 PBS 洗涤细胞三次，以去除未结合的 DFHBI-1T。
6) 用新鲜的细胞培养基或成像缓冲液替换 PBS。
7) 立即使用配备 GFP 滤光片组的荧光显微镜对细胞进行成像，检测 Spinach2-DFHBI-1T 复合物的荧光。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

320.21

C₁₃H₉F₅N₂O₂

1539318-36-9

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis.

• [1]. Wenjiao Song, et al. Plug-and-play fluorophores extend the spectral properties of Spinach. J Am Chem Soc. 2014 Jan 29;136(4):1198-201.  [Content Brief]

  [2]. Grigory S Filonov, et al. Broccoli: rapid selection of an RNA mimic of green fluorescent protein by fluorescence-based selection and directed evolution. J Am Chem Soc. 2014 Nov 19;136(46):16299-308.  [Content Brief]