1. Others
  2. Biochemical Assay Reagents
  3. Orcein

Orcein 是一种特异性靶向弹性纤维的不可逆染色剂,可与弹性纤维中的蛋白质成分发生疏水相互作用。Orcein 使组织中的弹性纤维呈现紫色或紫红色。Orcein 可用于果蝇多线染色体的形态研究以及动脉粥样硬化斑块中弹性纤维、胶原纤维等成分的定性与定量分析。

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Orcein

Orcein Chemical Structure

CAS No. : 1400-62-0

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2.  同一机构(单位)同一产品试用装仅限申领一次,同一机构(单位)一年内

     可免费申领三个不同产品的试用装。

3.  试用装只面向终端客户

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Customer Review

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

Orcein is an irreversible stain that specifically targets elastic fibers and can interact hydrophobically with the protein components in elastic fibers. Orcein makes elastic fibers in tissues appear purple or purple-red. Orcein can be used for morphological studies of Drosophila polytene chromosomes and for qualitative and quantitative analysis of elastic fibers, collagen fibers and other components in atherosclerotic plaques[1][2].

体外研究
(In Vitro)

Orcein 染料在酸性条件下与染色质的负电荷基团或通过疏水作用结合,使染色体着色。Orcein 主要用于果蝇 (Drosophila) 三龄幼虫唾液腺中的多线染色体 (polytene chromosomes) 染色,亦可用于中肠、后肠及脂肪体等组织的染色体观察[1]
Orcein 可用于染色组织样本,在组织学和细胞生物学中,主要用于染色弹性纤维、胶原蛋白、核酸和细胞成分[2]

醋酸地衣红 (Aceto-orcein) 染色法[1]
Orcein 染色时,加入乙酸固定可使染色体在压片时于间带区域伸展,提升带型分辨率;乳酸的加入可软化腺体,促进染色体铺展。
1. 材料
培养基:Texas 香蕉琼脂、酵母-葡萄糖-琼脂、Carolina 果蝇即时饲料。
缓冲液/固定液:Drosophila Ringers 液、PBS、0.8% NaCl、45% 乙酸。
染色液:乳酸-乙酸-orcein 染液 (按 Lim 法配制:1 g 天然 orcein 溶于 50 mL 乳酸,过滤;1 g 天然 orcein 溶于 50 mL 冰乙酸,加热过滤;三者按 1:1:1 混合)。
耗材:5 号镊子、硅化盖玻片、包被载玻片、Probe-On-Plus 载玻片、Permount 封片剂。
2. 操作步骤
幼虫培养与挑选:
用上述培养基培养三龄幼虫,18°C 下培养可获得更大染色体;挑选未化蛹、体型饱满的幼虫,用 PBS 或 Ringers 液冲洗体表培养基。
解剖与腺体分离:
将幼虫置于含 45% 乙酸的载玻片上,在解剖镜下用双镊子分别夹住头部和尾部,快速拉扯使头部脱落,暴露唾液腺 (透明长囊状结构,附着脂肪组织)。
剥离腺体,去除前端导管及多余脂肪,在 45% 乙酸中固定 2-5 分钟。
染色与压片:
将腺体转移至乳酸-乙酸-orcein 染液中,染色 5 分钟 (避免染液蒸发)。
转移至含 1:2:3 固定液的载玻片上,盖上盖玻片,用解剖针轻敲盖玻片使染色体铺展,再用吸水纸轻压 blotting (避免盖玻片移位)。
封片与观察:
临时封片:用指甲油密封盖玻片边缘;永久封片:硅化盖玻片经干冰-乙醇冷冻后揭下,依次用 95% 和 100% 乙醇脱水,Permount 封片。
显微镜观察:通过端粒形态、带型特征 (如 puff、缢缩区) 识别染色体臂 (如 X、2L、2R、3L、3R)。
3. 注意事项
45% 乙酸固定可减少染色体 puffing,优于生理盐水解剖。
压片时避免用力过大导致染色体断裂,螺旋或之字形轻压可促进均匀铺展。
不同果蝇品系、培养条件可能导致带型差异,需结合标准图谱分析。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

体内研究
(In Vivo)

Orcein (1 g/100 mL;20 min,56°C) 在 apoE/LDLR-/- 小鼠臂头动脉粥样硬化斑块模型中,与 Martius Scarlet Blue (MSB) 联合染色 (OMSB) 时,可将弹性纤维染成紫色,胶原纤维染成蓝色,红细胞染成黄色,成熟纤维蛋白染成红色,从而实现斑块成分的定性与定量分析[2]

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

Clinical Trial
CAS 号
性状

固体

颜色

Reddish brown to black

中文名称

苔红素

运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

4°C, protect from light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

溶解性数据
细胞实验: 

DMSO 中的溶解度 : 100 mg/mL (超声助溶 (<60°C); 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

H2O 中的溶解度 : < 0.1 mg/mL (insoluble)

Ethanol 中的溶解度 : < 1 mg/mL (insoluble)

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验:

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL; 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

    生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: 2.5 mg/mL; 悬浊液; 超声助溶

    此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液,悬浊液可用于口服和腹腔注射。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。

    2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。
动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
请输入您的动物体内配方组成:
%
DMSO +
+
%
Tween-80 +
%
Saline
如果您的动物是免疫缺陷鼠或者体弱鼠,建议 DMSO 中的在最后工作液体系中的占比尽量不超过 2%。
方案所需 助溶剂 包括:DMSO ,均可在 MCE 网站选购。 Tween 80,均可在 MCE 网站选购。
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
储备液配制方法 : mg 药物溶于 μL  DMSO(母液浓度为 mg/mL)。

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)

您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,以下方案仅供参考,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
动物实验体内工作液的配制方法 : 取 μL DMSO 储备液,加入 μL  μL ,混合均匀至澄清,再加 μL Tween 80,混合均匀至澄清,再加 μL 生理盐水
连续给药周期超过半月以上,请谨慎选择该方案。
请确保第一步储备液溶解至澄清状态,从左到右依次添加助溶剂。您可采用超声加热 (超声清洗仪,建议频次 20-40 kHz),涡旋吹打等方式辅助溶解。
纯度 & 产品资料

参考文献
Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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产品名称:
Orcein
目录号:
HY-122266
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