EGFR 抗体 (YA775)

目录号: HY-P80648: Data Sheet SDS COA 抗体使用指南
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EGFR Antibody (YA775) 是一个小鼠来源、无偶联标记、抗 EGFR 的 IgG1 单克隆抗体。

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WB: 蛋白质免疫印迹;
IHC-P: 石蜡切片样本的免疫组织化学;
IHC-F: 冰冻切片样本的免疫组织化学;
ICC/IF: 细胞免疫荧光;
IF-Tissue: 组织免疫荧光;
mIHC: 多重荧光免疫组化;
IP: 免疫沉淀;
ChIP: 染色质免疫沉淀;
FC: 流式细胞术;
ELISA: 酶联免疫吸附试验

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描述

EGFR Antibody (YA775) is a Mouse-derived and non-conjugated IgG1 monoclonal antibody, targeting to EGFR.

宿主

Mouse

克隆性

Monoclonal

分子量

Predicted band size: 134 kDa;

Observed band size: 175 kDa

请注意：因蛋白存在修饰或聚体等情况，以实测为准，预测仅为参考。

反应种属

Human, Monkey

蛋白数据库

P00533

基因 ID

1956 [NCBI]

免疫原

Synthetic peptide corresponding to Human EGFR.The exact sequence is proprietary to MCE.

应用 & 推荐
稀释比例

应用	稀释比
WB WB: 蛋白质免疫印迹	1:500-1:1000
ICC/IF ICC/IF: 细胞免疫荧光	1:50-1:200
IP IP: 免疫沉淀	1:20

敏感性	Endogenous	纯度	affinity purified
偶联	Non-conjugated	修饰	Unmodified
同型	IgG1

性状

液体

组分

Supplied in 1*PBS (pH 7.3), 50% glycerol and 0.5% BSA. Preservative: 0.02% sodium azide.

保存条件 & 期限

Stored at -20°C for 1 year. Avoid repeated freeze / thaw cycles.

运输条件

Shipping with blue ice.

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ALL WB ICC

Western blot analysis of extracts from A549(lane 2(20ug) and A549(lane 3(40ug) using EGFR Antibody (HY-P80648) Rabbit mAb. Proteins were transferred to a PVDF membrane and blocked with 5% non-fat milk in TBST for 2 hour at room temperature. The primary antibody (1/1000) and Loading control antibody (Beta Actin, HY-P83730, 1/10000) was used in 5% non-fat milk in TBST at 4°C overnight. Goat Anti-Mouse/Rabbit IgG-HRP Secondary Antibody (1/10000) was used for 1 hour at room temperature.
Immunocytochemistry analysis of Hela cells labeling EGFR with EGFR Antibody (HY-P80648) at 1/50 dilution. Cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 15 minutes at room temperature, permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 10 minutes at room temperature, then blocked with QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining for 10 min at room temperature. Cells were then incubated with EGFR Antibody (HY-P80648) at 1/50 dilution in QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining at 4 ℃. Alexa Fluor® 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG H&L（HY-P8005, Green) was used as the secondary antibody at 1/1,000 dilution. PBS instead of the primary antibody was used as the secondary antibody only control. The Nuclear counterstain was DAPI (Blue).
Immunocytochemistry analysis of Hela cells labeling EGFR with EGFR Antibody (HY-P80648) at 1/100 dilution. Cells were fixed in 4% paraformaldehyde for 15 minutes at room temperature, permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 10 minutes at room temperature, then blocked with QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining for 10 min at room temperature. Cells were then incubated with EGFR Antibody (HY-P80648) at 1/100 dilution in QuickBlock™ Blocking Buffer for Immunol Staining at 4 ℃. Alexa Fluor® 488-conjugated AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG H&L（HY-P8005, Green) was used as the secondary antibody at 1/1,000 dilution. PBS instead of the primary antibody was used as the secondary antibody only control. The Nuclear counterstain was DAPI (Blue).

背景

功能：EGF 家族的受体酪氨酸激酶结合配体，激活多个信号级联，将细胞外信号转化为适当的细胞反应 (PubMed:10805725, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:35538033)。已知配体包括 EGF、TGFA/TGF-α、AREG、epigen/EPGN、BTC/βcellulin、epiregulin/EREG 和 HBEGF/肝素结合 EGF (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029, PubMed:20837704, PubMed:27153536, PubMed:2790960, PubMed:7679104, PubMed:8144591, PubMed:9419975)。配体结合触发受体同源和/或异源二聚化以及关键胞质残基的自身磷酸化。磷酸化的受体募集衔接蛋白，例如 GRB2，进而激活复杂的下游信号级联反应。至少激活 4 个主要的下游信号通路，包括 RAS-RAF-MEK-ERK、PI3 激酶-AKT、PLCγ-PKC 和 STATs 模块 (PubMed:27153536)。也可能激活 NF-κB 信号通路 (PubMed:11116146)。此外，它还能直接磷酸化其他蛋白，例如 RGS16，激活其 GTP 酶活性，并可能将 EGF 受体信号与 G 蛋白偶联受体信号偶联 (PubMed:11602604)。它还能磷酸化 MUC1，并增强其与 SRC 和 CTNNB1/β-catenin 的相互作用 (PubMed:11483589)。通过与 CCDC88A/GIV 相互作用正向调节细胞迁移，CCDC88A/GIV 在配体刺激后将 EGFR 保留在细胞膜上，促进 EGFR 信号传导，从而触发细胞迁移 (PubMed:20462955)。在增强学习和记忆能力方面发挥作用 (基于相似性)。在哺乳动物疼痛信号传导 (持久性痛觉过敏) 中发挥作用 (基于相似性)；异构体 2 可能作为 EGF 作用的拮抗剂；(微生物感染) 作为肝细胞中丙型肝炎病毒 (HCV) 的受体，促进其进入细胞。通过促进 HCV 进入所必需的 CD81-CLDN1 受体复合物的形成以及增强表达 HCV 包膜糖蛋白的细胞的膜融合来介导 HCV 进入。

亚细胞定位：细胞膜；I 型单次跨膜蛋白；内质网膜；I 型单次跨膜蛋白；高尔基体膜；I 型单次跨膜蛋白；核膜；I 型单次跨膜蛋白；内体；内体膜；细胞核；分泌型

表达水平：
组织特异性：普遍表达。异构体 2 也在卵巢癌中表达。

异构体 & 翻译后修饰：P00533 有 4 种异构体：P00533-1：134277 Da (预测值)；P00533-2：44664 Da (预测值)；P00533-3：77312 Da (预测值)；P00533-4：69228 Da (预测值)。
EGF 可诱导酪氨酸残基磷酸化 (PubMed：20462955，PubMed：27153536)。Ser-695 位点的磷酸化是部分磷酸化的，且仅在 Thr-693 位点磷酸化时发生。PRKD1 对 Thr-678 和 Thr-693 位点的磷酸化可抑制 EGF 诱导的 MAPK8/JNK1 激活。PTPRJ 介导的去磷酸化可阻止内吞作用，并使受体稳定在质膜上。 Tyr-1197 的自磷酸化受 Arg-1199 甲基化的刺激，并增强与 PTPN6 的相互作用。Tyr-1092 和/或 Tyr-1110 的自磷酸化可募集 STAT3。PTPN1 和 PTPN2 可使其去磷酸化；EGF 刺激后可使其发生单泛素化和多泛素化；这不影响酪氨酸激酶活性或信号传导能力，但可能在溶酶体靶向中发挥作用 (PubMed:27153536)。多泛素连接主要通过 Lys-63，但也存在通过 Lys-48、Lys-11 和 Lys-29 的连接。OTUD7B 的去泛素化作用可阻止其降解。RNF115 和 RNF126 可使其泛素化 (基于相似性)。在 EGF 刺激下，EGFR 可被 ZNRF1 或 CBL 在不同赖氨酸残基上泛素化，导致 ESCRT 机制的募集，随后在溶酶体中降解 (PubMed:33996800)。UCHL1 可使其去泛素化，从而抑制其降解 (基于相似性)；EGFR 可被 ZDHHC20 在半胱氨酸残基上棕榈酰化。棕榈酰化抑制配体结合后的内吞作用，并增加酪氨酸磷酸化 EGFR 在细胞膜上的持久性。棕榈酰化增强 EGFR 信号的强度和持续时间；EGFR 可被甲基化。PRMT5 介导的 Arg-1199 甲基化可刺激 Tyr-1197 的磷酸化。

亚基：配体结合触发受体的同源二聚化和/或异源二聚化，进而触发其自身磷酸化。与 ERBB2 形成异源二聚体 (PubMed:10805725)。与 CCDC88A/GIV (通过 SH2 样结构域) 和 GNAI3 形成复合物，从而增强 EGFR 信号传导并触发细胞迁移；与 CCDC88A 的结合需要 EGFR C 端区域的自身磷酸化，并且配体刺激是 GNAI3 募集到该复合物所必需的 (PubMed:20462955, PubMed:25187647)。与 ERRFI1 相互作用；抑制激酶结构域的二聚化和自身磷酸化 (PubMed:18046415)。与 ERBB2 和 PIK3C2A 或 PIK3C2B 形成复合物 (PubMed:10805725)。与 GRB2 相互作用；GRB2 是一种衔接蛋白，可将受体与下游信号通路偶联。与 GAB2 相互作用；GAB2 参与 EGFR 下游信号传导。与 STAT3 相互作用；STAT3 介导 EGFR 下游信号传导，促进细胞增殖。与 RIPK1 相互作用；RIPK1 参与 NF-κB 激活。与 CBL、CBLB 和 CBLC 相互作用 (自身磷酸化)；CBL 参与 EGFR 泛素化和调控；在张力蛋白 TNS4 存在的情况下，与 CBL 的相互作用减弱 (PubMed:23774213)。与 SOCS5 相互作用；SOCS5 通过 ELOC 和 ELOB 介导的泛素化和蛋白酶体降解调控 EGFR 降解。与 PRMT5 相互作用；甲基化 EGFR 并增强其与 PTPN6 的相互作用。与 PTPN6 相互作用 (磷酸化)；抑制 EGFR 依赖的 MAPK/ERK 激活。与 COPG1 相互作用；通过从高尔基体到内质网的逆向运输，对 EGF 依赖的 EGFR 核转运的调控至关重要。与 TNK2 相互作用；这种相互作用依赖于 EGF 刺激和 EGFR 的激酶活性。与 PCNA 相互作用；正向调控 PCNA (PubMed:17115032)。与 PELP1 相互作用。与 MUC1 相互作用。与 AP2M1 相互作用。与 FER 相互作用。可能与 EPS8 相互作用；介导 EPS8 的磷酸化。通过 SH2 结构域与 GRB2、NCK1 和 NCK2 相互作用 (PubMed:10026169)。与 ATXN2 相互作用。与 GAREM1 相互作用。与 ANKRD13A/B/D 相互作用 (泛素化)；这种相互作用是直接的，可能在 EGF 刺激后调节 EGFR 内吞作用。与 GPER1 相互作用；这种相互作用以雌激素依赖的方式发生。通过 C 端胞质激酶结构域与 ZPR1 相互作用 (通过锌指结构域)。与 RNF115 和 RNF126 相互作用 (PubMed:23418353)。通过其跨膜结构域与 GPRC5A 相互作用 (PubMed:25311788)。与 FAM83B 相互作用；在未受 EGF 刺激的情况下，通过诱导 EGFR 的自身磷酸化来正向调节 EGFR (PubMed:23912460)。与 LAPTM4B 相互作用；与 EGFR 激活呈正相关 (PubMed:28479384)。与 STX19 相互作用 (PubMed:16420529)。与 CD44 相互作用 (PubMed:23589287)。与 PGRMC1 相互作用；该相互作用需要 PGRMC1 同源二聚化 (PubMed:26988023)。与 PIKFYVE 相互作用 (PubMed:17909029)。与 NEU3 相互作用。与 TRAF4 相互作用 (PubMed:30352854)。与蚁毒 OMEGA-myrmeciitoxin (O2)-Mg1a 相互作用 (基于相似性)。与 CD82 相互作用；该相互作用促进配体诱导的受体内吞作用及其随后的脱敏 (PubMed:35538033)。

RRID

AB_3102643

反应种属数据库

Entrez Gene: 1956 Human ;

SwissProt: P00533 Human ;

OMIM: 211980 Human

研究领域

Signal Transduction

中文名

EGFR 抗体 (YA775)

同用名

EGFR; ERBB; ERBB1; HER1; Epidermal growth factor receptor; Proto-oncogene c-ErbB-1; Receptor tyrosine-protein kinase erbB-1

文件资料

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Data Sheet (443 KB) SDS (251 KB)

COA (193 KB)

抗体使用指南 (1083 KB)

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Help & FAQs

Do most proteins show cross-species activity?
Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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