1. Metabolic Enzyme/Protease
  2. Endogenous Metabolite
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trans-Cyclohexane-1,2-diol 

目录号: HY-W010514 纯度: 99.74%
COA 产品使用指南 技术支持

trans-Cyclohexane-1,2-diol (TCHD) 是一种核孔复合物 (NPC) 的暂时性扩张剂。trans-Cyclohexane-1,2-diol 通过与 NPC 的疏水核心 (FG 核孔蛋白) 相互作用,可破坏 NPC 结构并可逆性增加核孔通透性,使大于 40 kDa 的大分子 (如质粒 DNA) 能通过被动扩散进入细胞核,增强非病毒载体的核导入效率。trans-Cyclohexane-1,2-diol 可提升体外电转染或脂质介导的基因转染效率,尤其在分化的气道上皮细胞中显著增加基因表达。

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trans-Cyclohexane-1,2-diol

trans-Cyclohexane-1,2-diol Chemical Structure

CAS No. : 1460-57-7

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Customer Review

  • 生物活性

  • 纯度 & 产品资料

  • 参考文献

生物活性

trans-Cyclohexane-1,2-diol (TCHD) is a transient dilator of the nuclear pore complex (NPC). By interacting with the hydrophobic core (FG nucleoporin) of the NPC, trans-Cyclohexane-1,2-diol can disrupt the NPC structure and reversibly increase the permeability of the nuclear pore, allowing macromolecules larger than 40 kDa (such as plasmid DNA) to enter the cell nucleus by passive diffusion, thereby enhancing the nuclear import efficiency of non-viral vectors. trans-Cyclohexane-1,2-diol can improve the efficiency of in vitro electrotransfection or lipid-mediated gene transfection, especially significantly increasing gene expression in differentiated airway epithelial cells[1][2].

体外研究
(In Vitro)

脂质介导转染实验:
trans-Cyclohexane-1,2-diol (0.5%-2%;1 h) 在 293T 细胞中剂量依赖性提升 Lipofectamine 和 GL67A 介导的荧光素酶基因表达,≥1.5% 浓度可导致 80% 细胞蛋白损失,显示显著细胞毒性[1]
电转染实验:trans-Cyclohexane-1,2-diol (1%;10-30 分钟) 在 B16F10 和 CHO 细胞中,均显著提升 GFP/Tomato 基因表达 (1.5-2.5 倍荧光强度增幅) ,且细胞活力未受抑制[2]

trans-Cyclohexane-1,2-diol (TCHD) 体外电转染 Protocol[2]
实验材料
(1) B16F10 小鼠黑色素瘤细胞、CHO (中国仓鼠卵巢) 细胞培养至 70% 汇合度,用胰酶消化后重悬于电转缓冲液 (PB:10 mM K2HPO4/KH2PO4,1 mM MgCl2,250 mM 蔗糖,pH 7.4,细胞浓度调整为 5×106 cells/mL。
(2) 质粒 DNA:pCMV-eGFP-C1 或 pCMV-CpGfree-tdTomato,浓度 20 μg/mL (溶于电转缓冲液)。
(3) 试剂:TCHD 溶液:1% w/v (质量/体积),溶解于电转缓冲液,过滤灭菌。胎牛血清 (FBS)、结晶紫染色液、PBS 缓冲液。
(4) 设备:电转仪 (如 Electrocell S20)、平行不锈钢电极 (间距 0.4 cm)、荧光显微镜、流式细胞仪。
操作步骤
细胞准备:收集对数生长期细胞,离心后用 PB 缓冲液洗涤 2 次,重悬细胞至 5×106 cells/mL,加入质粒 DNA 至终浓度 20 μg/mL,混匀。
电转染参数设置
低场长脉冲 (LF-LP):6 个方波脉冲,600 V/cm,5 ms 脉冲时长,频率 1 Hz。
高场短脉冲 (HF-SP):4 个方波脉冲,1200 V/cm,100 μs 脉冲时长,频率 1 Hz。将 100 μL 细胞-DNA 悬液加入电极间隙,室温下施加电脉冲。
TCHD 处理:脉冲后立即处理:脉冲结束后,立即加入 20 μL 1% TCHD 溶液 (终浓度约 0.18% w/v),轻轻混匀。脉冲后孵育 10 分钟,再加入 20 μL 1% TCHD 溶液。两种处理均在 37°C 孵育 10、20 或 30 分钟,对照组加入等体积电转缓冲液。
细胞培养:孵育结束后,将细胞转移至含 10% FBS 的完全培养基 (DMEM 或 EMEM) ,接种于 12 孔板,37°C、5% CO2 培养 24 小时。
检测分析
(1) 24 小时后,结晶紫染色法检测细胞存活率。弃培养基,PBS 洗涤,加入 0.1% 结晶紫溶液染色 20 分钟,10% 乙酸溶解后测 595 nm 吸光度。
(2) 流式细胞术检测 GFP/Tomato 阳性细胞百分比及平均荧光强度 (MFI)。胰酶消化细胞,PBS 洗涤后重悬于 FACS 缓冲液 (含 2.5% FBS),用流式细胞仪分析。
(3) 固定细胞后,用荧光显微镜 (GFP 激发光 480/40 nm,发射光 527/40 nm;Tomato 激发光 560/40 nm,发射光 630/75 nm) 观察荧光蛋白表达分布。
关键参数与优化 TCHD 浓度:最佳终浓度为 0.18% w/v (即 1% 母液按 1:6 体积添加),更高浓度 (如 2%) 可能导致细胞毒性。

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

分子量

116.16

Formula

C6H12O2

CAS 号
性状

固体

颜色

White to off-white

结构分类
初始来源
运输条件

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

储存方式

Store at room temperature 3 years

In solvent -80°C 2 years
-20°C 1 year
溶解性数据
细胞实验: 

H2O 中的溶解度 : 100 mg/mL (860.88 mM; 超声助溶)

DMSO 中的溶解度 : 50 mg/mL (430.44 mM; 超声助溶; 吸湿的 DMSO 对产品的溶解度有显著影响,请使用新开封的 DMSO)

配制储备液
浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 8.6088 mL 43.0441 mL 86.0882 mL
5 mM 1.7218 mL 8.6088 mL 17.2176 mL
查看完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 2 years; -20°C, 1 year。-80°C储存时,请在2年内使用,-20°C储存时,请在1年内使用。

* 备注:如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

  • 摩尔计算器

  • 稀释计算器

Mass (g) = Concentration (mol/L) × Volume (L) × Molecular Weight (g/mol)

质量
=
浓度
×
体积
×
分子量 *

Concentration (start) × Volume (start) = Concentration (final) × Volume (final)

This equation is commonly abbreviated as: C1V1 = C2V2

浓度 (start)

C1

×
体积 (start)

V1

=
浓度 (final)

C2

×
体积 (final)

V2

动物实验:

请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用
以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    40% PEG300    5% Tween-80    45% Saline

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (21.52 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL

    生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
  • 方案 二

    请依序添加每种溶剂: 10% DMSO    90% (20% SBE-β-CD in Saline)

    Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (21.52 mM); 澄清溶液

    此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。

    1 mL 工作液为例,取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。

    2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。

以下溶解方案,请直接配制工作液。建议现用现配,在短期内尽快用完。 以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比; 如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶。

  • 方案 一

    请依序添加每种溶剂: PBS

    Solubility: 110 mg/mL (946.97 mM); 澄清溶液; 超声助溶

动物溶解方案计算器
请输入动物实验的基本信息:

给药剂量

mg/kg

动物的平均体重

g

每只动物的给药体积

μL

动物数量

由于实验过程有损耗,建议您多配一只动物的量
计算结果
工作液所需浓度 : mg/mL
该产品水溶性佳,请具体参考实测 水 / PBS / Saline 中的溶解度数据。
您所需的储备液浓度超过该产品的实测溶解度,如有需要,请与 MCE 中国技术支持联系。
纯度 & 产品资料

纯度: 99.94%

参考文献

完整储备液配制表

* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;一旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效
储备液的保存方式和期限:-80°C, 2 years; -20°C, 1 year。-80°C储存时,请在2年内使用,-20°C储存时,请在1年内使用。

可选溶剂 浓度 溶剂体积 质量 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg
DMSO / H2O 1 mM 8.6088 mL 43.0441 mL 86.0882 mL 215.2204 mL
5 mM 1.7218 mL 8.6088 mL 17.2176 mL 43.0441 mL
10 mM 0.8609 mL 4.3044 mL 8.6088 mL 21.5220 mL
15 mM 0.5739 mL 2.8696 mL 5.7392 mL 14.3480 mL
20 mM 0.4304 mL 2.1522 mL 4.3044 mL 10.7610 mL
25 mM 0.3444 mL 1.7218 mL 3.4435 mL 8.6088 mL
30 mM 0.2870 mL 1.4348 mL 2.8696 mL 7.1740 mL
40 mM 0.2152 mL 1.0761 mL 2.1522 mL 5.3805 mL
50 mM 0.1722 mL 0.8609 mL 1.7218 mL 4.3044 mL
60 mM 0.1435 mL 0.7174 mL 1.4348 mL 3.5870 mL
80 mM 0.1076 mL 0.5381 mL 1.0761 mL 2.6903 mL
100 mM 0.0861 mL 0.4304 mL 0.8609 mL 2.1522 mL

* 备注:如您选择水作为储备液,请稀释至工作液后,再用 0.22 μm 的滤膜过滤除菌后使用。

Help & FAQs
  • Do most proteins show cross-species activity?

    Species cross-reactivity must be investigated individually for each product. Many human cytokines will produce a nice response in mouse cell lines, and many mouse proteins will show activity on human cells. Other proteins may have a lower specific activity when used in the opposite species.

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