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磁珠 (二)丨磁珠 Protocol,如何快速捕获您心仪的蛋白~

 

 

MCE 磁珠产品线提供多种高蛋白载量、高特异性的全类磁珠产品,同时提供配套磁力架,助力科研每一步!

 
 
 
磁珠的优势
 
 
蛋白荷载量高
 特异性强、非特异性结合性低
 样品损失小
 操作方便

 

 
如何操作
 
 

磁珠预处理

 

将磁珠充分混悬,取 25-50 μL 磁珠,置于 1.5 mL EP 管中,加入 400 μL 结合/洗涤缓冲液,充分混悬置于磁力架磁性分离弃上清;重复以上洗涤步骤 2 次。

 

实验方法

 

Step 1. 裂解细胞并准备用于免疫沉淀的样品。

 

Step 2. 预处理样品:通过将裂解样品单独与珠子或与无关抗体结合,以除去能与 IP 组分非特异性结合的任何蛋白质。

 

Step 3. 使用针对目的蛋白的抗体孵育溶液,用直接法或用间接法将抗体固定在磁珠上。继续孵育,以形成抗体-目的蛋白复合物。

 

Step 4. 沉淀微珠-抗体-目的蛋白复合物,去除上清液。

 

A/G 磁珠的 IP 实验

 

Step 5. 洗涤沉淀的复合物数次。使用磁珠时,每次洗涤置于磁性分离架上即可除去上清液。最后一次洗涤后,需要除去尽可能多的上清液。

 

Step 6. 使用低 pH 或 SDS 样品上样缓冲液从磁珠上洗脱蛋白质。

 

Step 7. 分析目的蛋白或蛋白复合物:十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) ,染色,质谱,Western Blotting 等。

 

注:具体操作细节,还需仔细阅读对应产品说明书

 

MCE 磁珠产品

 

MCE 磁珠产品

HY-K0202   Protein A/G Magnetic Beads

25 μL 磁珠/ 500 μL细胞裂解液
IP/Co-IP/ChIP

HY-K0203   Protein A Magnetic Beads

25 μL 磁珠/ 500 μL细胞裂解液
IP/Co-IP/ChIP

HY-K0204   Protein G Magnetic Beads

25 μL 磁珠/ 500 μL细胞裂解液
IP/Co-IP/ChIP

HY-K0201  Anti-HA Magnetic Beads

10 μL 磁珠/ 500 μL细胞裂解液

IP/Co-IP/蛋白纯化

HY-K0206   Anti-c-Myc Magnetic Beads

10 μL 磁珠/ 500 μL细胞裂解液

IP/Co-IP/蛋白纯化

HY-K0207   Anti-Flag Magnetic Beads

10 μL 磁珠/ 500 μL细胞裂解液

IP/Co-IP/蛋白纯化

HY-K0208   Streptavidin Magnetic Beads

每次结合使用 100 μL 磁珠

IP/Co-IP/ChIP/细胞分选/蛋白纯化/核酸杂交

MCE 的所有产品仅用作科学研究,我们不为任何个人用途提供产品和服务。

 

MCE 多功能磁力架——磁珠完美搭档

 

 

MCE 磁力架产品是磁珠专用配套设备,支持 MCE 全线磁珠类产品:


优雅外观
强磁磁芯
优化设计:“三明治”孔板
兼容
:200 μL-2 mL-15 mL

 

客户验证
 

HY-K0201 Anti-HA Magnetic beads

 

HY-K0208 Streptavidin Magnetic Beads